[发明专利]一种快速筛查鱼肉中多种兽药残留的检测方法

摘要

本发明公开了一种快速筛查鱼肉中多种兽药残留的检测方法，首先配制31种标准溶液，进行测定，并绘制标准工作曲线，采用QuEChERS的方法对样品进行前处理，有效地减少了基质对目标化合物(包括β－内酰胺类、非甾体类抗炎药等31种兽药残留)的干扰影响，再将处理后的样品用超高效液相色谱‑高分辨质谱仪测定。本发明可以测定鱼肉中31种兽药残留，灵敏度高，检测限为0.1μg/kg～2.5μg/kg，检测方法简单、快速、准确、灵敏度高、精密度好，适用于大批量检测鱼肉样品，能够准确的对目标化合物进行定量、定性分析，避免了假阳性的现象出现。

主权项

1.一种快速筛查鱼肉中多种兽药残留的检测方法，其特征在于包括以下步骤：(1)标准溶液配制：准确称取苯唑青霉素钠、氨苄青霉素、氯唑西林钠、双钠青霉素钠盐水合物、头孢噻呋、萘夫西林钠一水合物、苯唑西林钠、苯氧甲基青霉素钾盐、哌拉西林标准品5.0mg，于各自的5mL容量瓶中，用体积比为乙腈:水＝30:70的乙腈水溶液溶解并定容至刻度，制成质量浓度为1mg/mL的标准储备液，准确称取2‑氨基‑5‑苯并咪唑、妥曲珠利、克拉珠利、酮洛芬、美洛昔康、对乙酰氨基酚、吡罗昔康、水杨酸、舒林酸、托灭酸、托美丁钠、4‑氨基安替比林、4‑甲酰氨基安替比林、4‑甲氨基安替比林、保泰松、17α‑羟孕孕酮、醋酸美伦孕酮、乙酸甲地孕酮、甲羟孕酮、群地龙、勃地酮和诺龙标准品各5.0mg，于各自的5mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度，制成质量浓度为1mg/mL的标准储备液，置于4℃冰箱中保存；(2)样品的QuEChERS提取和净化：称取粉碎均匀的鱼肉样品2.0g于50mL高速离心管中，加入1.5g氯化钠、5g Na₂SO₄和10mL乙腈，涡旋震荡2min后超声提取10min，再以15000r/min，温度5℃离心10min，将上层液转移至已提前放入0.05g C18、0.08g正丙基乙二胺(PSA)、4g Na₂SO₄和0.025g氨丙基硅胶的25mL离心管中，涡旋震荡5min，再以15000r/min，温度5℃离心3min，上清液转入30mL玻璃管中，得样品提取液；(3)浓缩：将样品提取液在40℃下用平行定量浓缩仪减压浓缩至干，用1.0ml体积比为乙腈:水＝10:90的乙腈水溶液涡旋溶解残留物，提取液过0.2μm滤膜后，用超高效液相色谱‑高分辨质谱仪测定；所述超高效液相色谱‑高分辨质谱仪的参数为：色谱：ACQUITY UPLC BEH C18 100mm×2.1mm，1.7μm；柱温：40℃；进样量：10μL；流动相：A为0.1％甲酸水溶液，B为0.1％甲酸乙腈溶液；梯度洗脱程序0～1.0min，保持95％A；1.0～7.0min，流动相A的比例由95％线性变化至5％；7.0～10.0min，保持5％A；10.1～13min，保持95％A；质谱：加热电喷雾离子源温度为350℃，离子传输温度为320℃，鞘气为40unit，辅助气为40unit，毛细管电压为3.2KV，离子传输管温度为325℃；Full scan/ddms2扫描模式：采集范围为100～1500Da，正负切换采集；一级质谱分辨率为70000FWHM，二级质谱分辨率为17500FWHM；碰撞池能量NCE为20，40，60eV。