[发明专利]一种降低核桃外植体褐变率的培养基及培养方法

摘要

本发明公开了一种降低核桃外植体褐变率的培养基，包括蛭石和培养液；并且公开了一种降低核桃外植体褐变率的培养方法，于上述培养基中进行初代培养，并转接于培养液的琼脂培养基中进行继代培养。本发明培养基及培养方法防止核桃外植体褐化的效果显著，且适用于多种核桃品种，应用范围广，利于提高组培繁殖的成活率，加速良种及良砧无性苗的繁育。

主权项

1.一种降低核桃外植体褐变率的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)外植体培养前处理：采集核桃未木质化新梢，选取带有饱满芽的枝段，剪至3‑4厘米长，进行清洗和消毒；(2)初代培养：将蛭石倒入培养瓶中，加入培养液，盖上瓶盖，灭菌，即配制成初代培养基；将消毒后的外植体接于初代培养基中，培养12‑14天；蛭石与所述培养液的配比为：每10g蛭石中混合添加有15‑25mL培养液；所述培养液包括以下成分：硝酸铵1.4‑1.5g/L；硝酸钙1.8‑2.0g/L；硝酸锌0.015‑0.02g/L；硫酸钾1.5‑1.7g/L；硫酸镁0.6‑0.8g/L；硫酸锰0.03‑0.04g/L；硫酸铜0.002‑0.003g/L；氯化钙0.15‑0.2g/L；磷酸二氢钾0.2‑0.5g/L；硼酸0.004‑0.007g/L；钼酸钠0.003‑0.004g/L；乙二胺四乙酸二钠0.05‑0.06g/L；硫酸亚铁0.03‑0.05g/L；盐酸硫胺素0.001‑0.003g/L；烟酸0.001‑0.002g/L；甘氨酸0.001‑0.003g/L；肌醇0.1‑0.2g/L；蔗糖25‑35g/L；6‑苄氨基腺嘌呤0.0005‑0.0015g/L；吲哚丁酸0.00001‑0.00003g/L，pH 5.5‑6.0；初代培养25℃，光照循环：100μmol·m^‑2·s^‑116h+黑暗8h；(3)继代培养：将初代培养得到的外植体转接到所述培养液的琼脂培养基中，进行继代培养；所述培养液的琼脂培养基为每升所述培养液中添加6.5‑7.5g琼脂制得。