[发明专利]一种药物诱导的基因转录激活方法有效

专利信息
申请号: 201710553173.X 申请日: 2017-07-07
公开(公告)号: CN109207516B 公开(公告)日: 2020-12-01
发明(设计)人: 王宇;赵晨;张月 申请(专利权)人: 中国科学院动物研究所
主分类号: C12N15/85 分类号: C12N15/85;C12N15/62;C07K19/00
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 代理人: 王文君;王璐
地址: 100190 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明涉及分子生物学领域,具体公开了一种药物诱导的基因转录激活方法。通过转染(ERT2)n‑TALE‑ADs系统或共转染HIT TALE‑SunTag体系至细胞质内,在特定需要的时间利用4‑OHT和/或TAM和/或他们的衍生物进行药物诱导,实现特定基因的转录激活;所述(ERT2)n‑TALE‑ADs系统为可表达(ERT2)n‑TALE‑ADs融合蛋白的载体;所述HIT TALE‑SunTag体系为可分别表达融合蛋白(1)与融合蛋白(2)中的一种或多种的载体组合:(1)NLS‑TALE‑GCN4或ERT2‑TALE‑GCN4或(ERT2)n‑TALE‑GCN4,(2)ScFv‑ERT2‑ADs或ScFv‑(ERT2)n‑ADs。本发明基于ERT2的融合实现了4‑OHT诱导的TALE转录激活体系。该体系有助于对动态生物学过程进行有效地精确地控制,对于生物医药的研究和开发应用也有很大的价值。
搜索关键词: 一种 药物 诱导 基因 转录 激活 方法
【主权项】:
1.一种药物诱导的基因转录激活方法,其特征在于,通过转染(ERT2)n‑TALE‑ADs系统或共转染HIT TALE‑SunTag体系至细胞质内,在特定需要的时间利用4‑OHT和/或TAM和/或他们的衍生物进行药物诱导,实现特定基因的转录激活;所述(ERT2)n‑TALE‑ADs系统为可表达(ERT2)n‑TALE‑ADs融合蛋白的载体;其中,n=2‑5,ADs为转录效应因子组合;所述HIT TALE‑SunTag体系为可分别表达融合蛋白(1)与融合蛋白(2)中的一种或多种的载体组合:(1)NLS‑TALE‑GCN4或ERT2‑TALE‑GCN4或(ERT2)n‑TALE‑GCN4,(2)ScFv‑ERT2‑ADs或ScFv‑(ERT2)n‑ADs,其中,n=2‑5,ADs为转录效应因子组合;上述融合蛋白由左至右为N端至C端,各元件之间可以通过3~20个氨基酸的linker相连;其中,(ERT2)n为n个串联的ERT2,GCN4为5‑30个拷贝的来自酵母转录激活因子GCN4的一段抗原表位短肽,ScFv为抗GCN4肽的单链抗体可变区,TALE为针对靶标基因的类转录激活因子效应物。
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