[发明专利]用于基因转录激活的药物诱导型CRISPR/Cas9系统

摘要

本发明涉及分子生物学领域，具体公开了用于基因转录激活的药物诱导型CRISPR/Cas9系统。所述药物诱导型CRISPR/Cas9系统包括靶向特定基因位点的16‑22nt sgRNA和如下(一)～(三)中的任意一种载体/载体组合：(一)表达融合蛋白dCas9‑(ERT2)n‑ADs或dCas9‑ADs‑(ERT2)n的载体；(二)表达融合蛋白dCas9‑(NLS)m或dCas9‑(ERT2)n和MCP‑(ERT2)n‑ADs的载体组合；(三)表达融合蛋白dCas9‑(NLS)m‑(GCN4)p和scFv‑(ERT2)n‑ADs的载体组合。经实验研究发现，相对于现有技术，本发明所述系统能够更加有效的实现药物诱导对基因转录激活的调控作用，操作更为灵活方便，且保持较低的背景活性。有助于对动态生物学过程进行有效精确的控制，对于生物医药的研究和开发应用也有很大的价值。

主权项

1.一种用于基因转录激活的药物诱导型CRISPR/Cas9系统，其特征在于，所述药物诱导型CRISPR/Cas9系统包括靶向特定基因位点的16‑22nt sgRNA和如下(一)～(三)中的任意一种载体/载体组合：(一)表达融合蛋白dCas9‑(ERT2)n‑ADs或dCas9‑ADs‑(ERT2)n的载体；(二)表达融合蛋白dCas9‑(NLS)m或dCas9‑(ERT2)n和MCP‑(ERT2)n‑ADs的载体组合；(三)表达融合蛋白dCas9‑(NLS)m‑(GCN4)p或dCas9‑(ERT2)n‑(GCN4)p和scFv‑(ERT2)n‑ADs的载体组合；其中，m＝1‑10，n＝1‑5，p＝5‑30；GCN4为来自酵母转录激活因子GCN4的一段抗原表位短肽，scFv为抗GCN4肽的单链抗体可变区，ADs为转录效应因子组合；所述融合蛋白由左至右为N端至C端，其中NLS可以在dCas9的N端或者C端或者两端融合，各元件之间可以通过3～20个氨基酸的linker相连。