[发明专利]一种旱稻孢囊线虫LAMP快速检测方法在审

专利信息
申请号: 201710554029.8 申请日: 2017-07-09
公开(公告)号: CN107142329A 公开(公告)日: 2017-09-08
发明(设计)人: 彭焕;彭德良;巧巧·吴泰;黄文坤;孔令安;贺文婷;丁中 申请(专利权)人: 中国农业科学院植物保护研究所
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11
代理公司: 北京兆君联合知识产权代理事务所(普通合伙)11333 代理人: 胡敬红
地址: 100193 *** 国省代码: 北京;11
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摘要: 发明涉及一种旱稻孢囊线虫LAMP快速检测方法。通过比对旱稻孢囊线虫核糖体rDNA‑ITS序列,筛选获得特异性位点,设计筛选出5条LAMP引物HE‑F3、HE‑B3、HE‑FIP、HE‑BIP和HE‑LB。本发明提取旱稻孢囊线虫基因组DNA,通过环介导等温扩增,再对扩增产物显色和观察,从而快速检测和鉴定出旱稻孢囊线虫,能够从14种植物线虫22个群体中特异的检测出旱稻孢囊线虫,检测阈值为1/20000头孢囊,灵敏度较普通PCR方法的高10倍。本发明的检测方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便、高效快捷,结果肉眼即可观察,在旱稻孢囊线虫快速检测和早期和田间诊断方面具有很高的应用价值。
搜索关键词: 一种 旱稻 孢囊 线虫 lamp 快速 检测 方法
【主权项】:
一种旱稻孢囊线虫LAMP快速检测方法,其特征在于:其中LAMP反应体系所使用的引物是:1)HE‑F3:5’‑GCTCTCTGTCCATGTCAGGA‑3’,2)HE‑B3:5’‑CCGCAACTAGCCCAATGC‑3’,3)HE‑FIP:5’‑GCAGGACAGCTGCCCATGTGGCGGATCGTTCGGGAGAA‑3’,4)HE‑BIP:5’‑GCGCAGCTTGGGATGCTTTTACCACAGGCTTACACTTGTG‑3’,5)HE‑LB:5’‑AGGTTGGAGCTGGGATGCG‑3’。
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