[发明专利]抗独特型抗体检测方法

摘要

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗独特型抗体检测方法。包括如下步骤：用包被缓冲液分别将样本溶液和阴性对照溶液稀释，得到样本稀释溶液和阴性对照稀释溶液；将酶标板上的微孔分为样本孔和阴性孔，并将样本稀释溶液和阴性对照稀释溶液分别加入到样本孔和阴性孔中静置处理后，倒去样本稀释溶液和阴性对照稀释溶液；在样本孔和阴性孔中依次加入封闭液进行封闭反应、标本稀释剂稀释的生物素‑单抗和链霉亲和素‑HRP进行连接反应、TMB底物显色液进行显色反应后，加入终止液，并用酶标仪测定所述样本孔和所述阴性孔中的光密度值确定样本溶液中是否存在所述单抗对应的抗独特性抗体。该方法步骤简单，提高了灵敏度，不会出现假阳性。

主权项

1.一种抗独特型抗体检测方法，其特征在于，包括如下步骤：用包被缓冲液分别将样本溶液和阴性对照溶液稀释，得到样本稀释溶液和阴性对照稀释溶液，所述阴性对照溶液含有同型对照抗体，所述同型对照抗体用于消除由于抗独特型抗体非特异性结合而产生的背景染色；将酶标板上的微孔分为样本孔和阴性孔，并将所述样本稀释溶液和所述阴性对照稀释溶液分别加入到所述样本孔和所述阴性孔中静置处理后，倒去所述样本稀释溶液和所述阴性对照稀释溶液；在所述样本孔和所述阴性孔中依次加入封闭液进行封闭反应、标本稀释剂稀释的生物素‑单抗和链霉亲和素‑HRP进行连接反应、TMB底物显色液进行显色反应后，加入终止液，并用酶标仪测定所述样本孔和所述阴性孔中的光密度值得OD_样本、OD_阴性对照；根据所述光密度值分析：当OD_样本/OD_阴性对照≥2.1时，所述样本溶液中含有所述单抗对应的抗独特性抗体，当OD_样本/OD_阴性对照＜2.1时，所述样本溶液中不存在所述单抗对应的抗独特性抗体。