[发明专利]依赖于混合抗体的循环肿瘤细胞分选和富集的方法

摘要

本发明公开了依赖于混合抗体的循环肿瘤细胞分选和富集的方法。该方法应用于早晚期的癌症病人临床样本的CTCs捕获分选。本发明的方法具有良好的循环癌细胞捕获效果。在血液1mL的情况下，晚期乳腺癌病人得到大于5个CTCs的捕获效果，同时应用间质型特异性抗体(波形蛋白抗体，anti‑vimentin antibody)修饰的系统捕获结果更接近依赖混合抗体系统(上皮和间质表型特征分子的抗体按照质量比1:1组合)的捕获结果；早期癌症病人依赖上皮型特异性抗体(上皮细胞吸附因子抗体，anti‑EpCAM antibody)修饰的抗体捕获的结果更接近依赖混合抗体系统的捕获结果。

主权项

一种依赖于混合抗体进行临床样本中循环肿瘤细胞分选和富集的方法，其特征在于：对依赖于抗原抗体相互作用进行癌细胞捕获的捕获装置或者载体进行修饰，使得整个捕获装置或者载体能够连接抗体，之后加入用PBS配置的1％BSA稀释的10μg/mL生物素连接的anti‑EpCAM抗体和anti‑vimentin抗体，室温孵育1小时，清洗，每次清洗都是浸泡在PBS溶液中，放在摇床上5分钟；最后，用PBS配制的5％的BSA溶液进行封闭，室温1小时来减少血细胞非特异性粘附；利用捕获装置或者载体对临床血液样本进行循环肿瘤细胞捕获；完成临床样本中循环肿瘤细胞分选和富集的方法。