[发明专利]一种野生百合组织培养方法

摘要

本发明属于花卉培育技术领域，提供了一种野生百合组织培养方法，包括（1）诱导愈伤组织；（2）愈伤组织的继代培养；（3）愈伤组织的扩增培养。本发明的目的是提供一种野生百合组织培养方法。该方法从外植体的选择和组织培养个阶段使用的培养基成分调整角度出发，从组织培养的源头和过程对污染率进行控制，从而减小污染率，且该方法易于操作，简单易行。

主权项

一种野生百合组织培养方法，其特征在于：所述组织培养方法包括如下步骤：（1）诱导愈伤组织：取野生百合蒴果，将蒴果切开，选取生长健壮、胚明显的种子，除去种皮经消毒后接种在愈伤组织诱导培养基上，接种时控制种子长度的三分之二埋在培养基内，培养20‑40天后，获得直径为0.3‑0.5cm的淡黄色、颗粒状的胚性愈伤组织团块，所述愈伤组织诱导培养是在完全黑暗、温度为20‑24℃的条件下进行；所述愈伤组织诱导培养基配方为：1/2MS、2，4‑二氯苯氧乙酸0.5‑1.3mg/L、α‑萘乙酸0.6‑1.0mg/L、6‑苄氨基腺嘌呤0.1‑0.4mg/L、氯化钠0.1‑0.3mg/L、杀菌中草药粉0.1‑2mg/L、葡萄糖20‑26g/L、琼脂6‑8g/L，pH值为5.6‑5.8；（2）愈伤组织的继代培养：愈伤组织诱导培养完成后，接种到继代培养基上进行继代培养，所述继代培养是在完全黑暗、20‑25℃的继代培养条件下进行；所述继代培养的培养基配方为：1/2MS、2，4‑二氯苯氧乙酸0.5‑1.1mg/L、2，4‑D 0.6‑1.1mg/L、6‑苄氨基腺嘌呤0.1‑0.3mg/L、氯化钠0.1‑0.2mg/L、杀菌中草药粉0.1‑1.5mg/L、果糖20‑25g/L、琼脂7‑9g/L，pH值为5.6‑5.8；（3）愈伤组织的扩增培养：愈伤组织团块在继代培养基上继代培养4个月后，将愈伤组织团块分切成0.2‑0.5cm的小块，接种到扩增培养基上，进行弱光培养，弱光培养是指在光照100‑700lux、温度25℃的条件下进行；所述扩增培养基配方为：1/2MS、2，4‑二氯苯氧乙酸0.2‑1.1mg/L、2，4‑D 0.3‑1.2mg/L、6‑苄氨基腺嘌呤0.1‑0.3mg/L、氯化钠0.1‑0.3mg/L、杀菌中草药粉0.1‑1.1mg/L、麦芽糖18‑27g/L、土豆泥0.2‑2g/L、琼脂6‑10g/L，pH值为5.6‑5.8。