[发明专利]一种利用纳米通道技术检测癌症的方法

摘要

本发明的提供一种利用纳米通道技术检测癌症的方法，通过检测癌症相关的microRNA标志物，实现癌症的早期检测，以填补该项目研究领域的空白。经验证，采用本方法可以简单、快速的检测出肿瘤生物标志物microRNA，并可根据其阻塞时间、电流幅度等判断出microRNA的种类。

主权项

一种利用纳米通道技术检测癌症的方法，该方法需要用到一种样品池，样品池分为cis和trans两个隔室（B，B'），隔室之间由120 ‑159μm的 Toflon薄膜隔离开，孔A与孔A'是用来第一次加液体和插入电极的，通过电极与膜片钳相连，将化学信号转化为电信号，之后液体的加入从下面三个小孔孔C和孔C'操作，其特征在于，该方法包括以下步骤：（1）在腔室B和腔室B'中分别放入磁子，然后分别从孔A和孔A'中注入超纯水；（2）取出磁子，倒出超纯水，并反复冲洗Toflon薄膜、腔室及孔洞，最后用无水乙醇冲洗；（3）冲洗干净后，用氮气将腔室内以及Toflon薄膜上残留的液滴吹干；（4）在Toflon薄膜两边靠近微米孔处分别加入H液，并迅速吹开，使其在膜上延展散开；（5）在腔室B和腔室B'中分别放入磁子，然后，从孔A和孔A'分别用移液器加入缓冲液，再分别插入Ag/AgCl电极；（6）孔A的电极与探头的trans端相连，孔A'的电极与探头的cis端相连；（7）分别在腔室B和腔室B'中加入L液，迅速轻吹，使L液在液面上均匀地铺开，然后等待30s‑1min；（8）从孔C和孔C'分别再加入缓冲液，观察是否形成磷脂双分子层，如形成，则进行后续实验；如未形成，则从孔C和孔C' 端反复吹打几次，直至其形成磷脂双分子层；（9）在形成磷脂双分子层后，对系统施加电压，在孔B'中加入α‑溶血素溶液，并开启孔B'的搅拌系统，控制合适的转速，搅拌约2min，形成纳米通道；（10）形成纳米通道后，在孔B'中加入一定量的microRNA，开启搅拌系统，搅拌约5s后，开始收集检测信号。