[发明专利]甾醇类半抗原‑碱性磷酸酶交联物的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了一种甾醇类半抗原‑碱性磷酸酶交联物及其制备方法。本发明利用修饰过的甾醇或甾醇类分子衍物所含有的羧基进行标记，利用碳二亚胺和N‑羟基琥珀酰亚胺将甾醇或甾醇类分子衍物标记到碱性磷酸酶分子上。本发明的制备碱性磷酸酶标记甾醇类半抗原的方法效率高；本发明的交联物的各组分的活性好；本发明的交联物的灵敏度高；本发明的方法操作简便，制备周期短；本发明的甾醇类半抗原‑碱性磷酸酶交联物。

主权项

甾醇类半抗原‑碱性磷酸酶交联物的制备方法，包括以下步骤：1)将式1所示含羧基的甾醇类半抗原与式2所示碳二亚胺类化合物反应得到式3所示O‑酰基异脲中间体；2)将步骤1)得到的O‑酰基异脲中间体体与式4所示的N‑羟基琥珀酰亚胺磺酸盐反应，得到式5所示的N‑羟基琥珀酰亚胺中酯中间体；3)将步骤2)得到N‑羟基琥珀酰亚胺中酯中间体与碱性磷酸酶进行交联反应，得到式6所示的甾醇类半抗原‑碱性磷酸酶交联物；其中，R为甾醇类化合物；R1是取代或未取代的C2‑10烷基，优选C2‑6烷基，更优选C2‑3烷基，所述烷基由选自以下的取代基任选取代：卤素、羟基、硫基、氰基、硝基、C1‑3烷基、C6‑10芳基、C1‑3烷氧基、C5‑7杂环基和C1‑3卤代烷基；R2是取代或未取代的环己烷基、异丙烷基、二甲基氨丙基团和吗啉乙基，取代基任选取代：卤素、羟基、硫基、氰基、硝基、C1‑3烷基、C6‑10芳基、C1‑3烷氧基、C5‑7杂环基和C1‑3卤代烷基；ALP为碱性磷酸酶。