[发明专利]一种鉴别肝螺杆菌的荧光定量PCR方法和荧光定量PCR试剂盒

摘要

本发明提供了一种鉴别肝螺杆菌的荧光定量PCR方法，将包含有PCR引物的反应体系进行荧光定量PCR反应；PCR引物包括上游引物和下游引物；反应体系包括以下组分上游引物，下游引物，SYBR Premix Ex TaqⅡ，ROX Reference DyeⅡ，样品DNA模版，ddH2O；程序包括95℃30s，95℃5s，52℃30s，72℃30s，40个循环，95℃15s，60℃1min，95℃15s；当Ct值小于33时，检测出肝螺杆菌，当Ct值大于等于33时，未检测出肝螺杆菌。与常规PCR相比，本发明的方法的灵敏度提高了1000倍。

主权项

一种鉴别肝螺杆菌的荧光定量PCR方法，其特征在于，将包含有PCR引物的反应体系进行荧光定量PCR反应；所述PCR引物包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；所述反应体系每20μL包括以下组分：10μM的上游引物0.8μL，10μM的下游引物0.8μL，SYBRPremix Ex TaqⅡ10μL，ROX Reference DyeⅡ0.4μL，样品DNA模版1μL，ddH2O 7μL；所述荧光定量PCR反应的程序包括：95℃预变性30s，95℃5s，52℃30s，72℃30s，40个循环，95℃15s，60℃1min，95℃15s；当Ct值小于33时，检测出肝螺杆菌，当Ct值大于等于33时，未检测出肝螺杆菌。