[发明专利]一种单波长激发双信号增强的Hg2+荧光比率法

摘要

本发明涉及一种单波长激发双信号增强的Hg²⁺荧光比率法，属于化学/生物传感及分析检测技术领域，具体地，向含有Mg²⁺的缓冲溶液中加入单链DNA分子A、单链DNA分子B、NMM和DAPI，得混合液Ⅰ，其中，分子A由Ⅰ和Ⅱ两部分组成，分子B由Ⅲ和Ⅳ两部分组成，分子A的部分Ⅰ和分子B的部分Ⅲ是含有T‑T碱基错配的部分互补序列，分子A的部分Ⅱ和分子B的部分Ⅳ是能形成四链体的富G序列；向混合液Ⅰ中加入Hg²⁺，振荡，测定荧光强度；其中，测量范围为400‑700 nm，激发波长为380 nm。该方法是一种双信号增强的新型Hg²⁺比率型荧光分析法，用于对样品中Hg²⁺的检测，选择性、准确度和可靠性都较高。

主权项

1.一种单波长激发双信号增强的Hg²⁺荧光比率法，其特征在于：包括以下步骤：步骤一、向含有Mg²⁺的Tris‑HNO₃缓冲溶液中加入单链DNA分子A、单链DNA分子B、N‑甲基卟啉二丙酸IX和4′,6‑二脒基‑2‑苯基吲哚，得混合液Ⅰ，使混合液Ⅰ中DNA分子A的浓度为0.25‑1.5µmol/L，DNA分子B的浓度为0.25‑1.5µmol/L，N‑甲基卟啉二丙酸 IX的浓度为0.25‑0.75µmol/L，4′,6‑二脒基‑2‑苯基吲哚的浓度为0.05‑0.5µmol/L；其中，单链DNA分子A由部分Ⅰ和部分Ⅱ两部分组成，单链DNA分子B由部分Ⅲ和部分Ⅳ两部分组成，所述单链DNA分子A的部分Ⅰ和单链DNA分子B的部分Ⅲ是含有T‑T碱基错配的部分互补序列，所述单链DNA分子A的部分Ⅱ和单链DNA分子B的部分Ⅳ是能形成G‑四链体的富G序列；所述含有Mg²⁺的Tris‑HNO₃缓冲溶液的pH为7‑8；步骤二、向混合液Ⅰ中加入含有Hg²⁺的样品，得混合液Ⅱ；步骤三、将混合液Ⅱ在22‑25℃条件下振荡25‑30 min，随即对混合液Ⅱ进行荧光强度测定；其中，测量范围为400‑700 nm，激发波长为380 nm，荧光激发狭缝宽度为10nm，荧光发射狭缝宽度为10 nm ，扫描速度为240 nm/min。