[发明专利]一种微囊化hBMP-2/Tet-on系统的构建方法有效
| 申请号： | 201710686595.4 | 申请日： | 2017-08-11 |
| 公开（公告）号： | CN107557389B | 公开（公告）日： | 2021-02-23 |
| 发明（设计）人： | 白波;钱东阳;张姝江;杜秀藩;黄芳立;陈艺;姚咏嫦 | 申请（专利权）人： | 广州医科大学附属第一医院 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 任重 |
| 地址： | 510120 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种微囊化hBMP‑2/Tet‑on系统的构建方法，包括如下步骤：S1.获取hBMP‑2基因，构建hBMP‑2‑GV347重组质粒；S2.将hBMP‑2‑GV347重组质粒转化、扩增后感染细胞，诱导，使用慢病毒载体进行包装，得到基因转染的BMSCs；S3.使用微胶囊包裹S2中得到的基因转染的BMSCs；本发明将Tet‑On系统与hBMP‑2同时构建于慢病毒载体上，可以提高两个系统的转染效率和表达，更加稳定和持续表达目的基因。转染BMSC后可以在强力霉素的作用下获得BMP‑2蛋白的稳定表达及促进BMSCs向成骨细胞分化。采用含酚基的羧甲基纤维素微囊进行包裹形成复合体，使上述系统在DOX的作用下，能稳定持续的向囊外分泌BMP‑2蛋白；停止使用DOX后，BMP‑2分泌即停止分泌。微囊中BMSCs细胞破囊后依然具备成骨分化能力，且可以在自分泌BMP‑2作用下成骨分化。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 微囊化 hbmp tet on 系统 构建 方法 | ||
【主权项】：
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