[发明专利]用于构建布鲁氏菌突变株的质粒pZF17-30及其构建方法和应用有效
申请号: | 201710696023.4 | 申请日: | 2017-08-14 |
公开(公告)号: | CN107619833B | 公开(公告)日: | 2021-03-02 |
发明(设计)人: | 刘正飞;郑可;汪洋;李娜 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12N15/74 | 分类号: | C12N15/74;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人: | 江丽丽;王敏锋 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: |
本发明提供了一种用于构建布鲁氏菌突变株的质粒pZF17‑30及其构建方法和应用,构建过程主要包括从商业化质粒pCMV‑BE3中扩增rAPOBEC1‑nCas9‑UGI片段,并将该片段与含有泛宿主复制子pBBR1‑MCS‑5和非特异性sgRNA的载体通过重组反应整合到一起,随后将ccdB基因与Chl抗性基因插入sgRNA中;利用限制性内切酶B |
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搜索关键词: | 用于 构建 布鲁氏菌 突变 质粒 pzf17 30 及其 方法 应用 | ||
【主权项】:
质粒pZF17‑30,其特征在于,所述质粒pZF17‑30的序列为SEQ ID NO.1所示。
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