[发明专利]检测金黄色葡萄球菌及肠毒素B试剂盒的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种检测金黄色葡萄球菌及肠毒素B试剂盒的制备方法及应用。将金黄色葡萄球菌吸附至鸡蛋壳膜表面，再加入修饰了金纳米簇的金黄色葡萄球菌DNA适配体，进行金颗粒显色，鸡蛋壳膜吸附金黄色葡萄球菌浓度不同，金颗粒显色不同，实现对金黄色葡萄球菌定性检测。先在鸡蛋壳膜上合成金纳米簇，通过金硫键接入带巯基的DNA适配体，再加入不同浓度的肠毒素B反应后，进行金颗粒显色，肠毒素B浓度不同，双氧水被分解的量不同，使得最后与柠檬酸三钠、聚乙二醇、氯金酸反应后显色效果不同。依据金颗粒吸光度值与抗原浓度的关系，计算未知样品中肠毒素B含量。本发明应用于食品、粮食作物、水中金黄色葡萄球菌或中肠毒素B的含量检测。

主权项

1.一种检测金黄色葡萄球菌试剂盒的制备方法，其特征在于包括如下步骤：（1）将金黄色葡萄球菌及参考细菌革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌和革兰氏阴性菌大肠埃希氏菌分别与鸡蛋壳膜孵育半小时，其中，枯草芽孢杆菌和大肠埃希氏菌作为对照；（2）依据金黄色葡萄球菌与金黄色葡萄球菌DNA适配体ATCC‑aptamer的特异性结合，再加入修饰了具有过氧化物模拟酶活性的金纳米簇的ATCC‑aptamer；（3）金颗粒显色步骤：向体系中加入柠檬酸三钠溶液、聚乙二醇溶液、双氧水溶液和氯金酸溶液，根据金黄色葡萄球菌浓度的不同，使其与ATCC‑aptamer连接的量也会不同，金颗粒呈现的颜色也不一样，如此达到定性检测金黄色葡萄球菌的目的。