[发明专利]一种微型器官的处理方法有效
| 申请号： | 201710776920.6 | 申请日： | 2017-08-30 |
| 公开（公告）号： | CN107560917B | 公开（公告）日： | 2019-10-11 |
| 发明（设计）人： | 陈萍;李田;张亮;陈曦;李亚腾 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | G01N1/30 | 分类号： | G01N1/30;G01N1/28 |
| 代理公司： | 重庆弘旭专利代理有限责任公司 50209 | 代理人： | 文巍 |
| 地址： | 400716*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种微型器官的处理方法，包括：依次将固定后的微型器官在透析液Ⅰ中1～10℃透析2～5天，在透析液Ⅱ中‑40～‑15℃透析4～8h，所述透析液Ⅰ配方为1M Tris碱液中含10%的Triton‑X 100、2%的BSA以及0.05M的NaCl，pH 6.8；透析液Ⅱ配方为体积比为4:1的乙醇和二甲基亚砜。本发明是对微型器官进行定型和整体通透处理，保持其原有形态，实现器官和组织细胞结构形态不变而大分子物质能充分渗透到各个部位的目的。经过这样处理的微型器官可以利用分子物质的特异性结合反应，再通过相应的观察手段如荧光显微镜等，就可以准确、灵敏地在微型器官上对分子进行细胞或亚细胞定位、定性以及相对定量分析。本发明针对生物领域微小动物内部器官很小、难以实施组织切片技术的困境，发明了一种适合体内微型器官在分子和细胞水平上进行研究的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 器官 透析液 透析 配方 特异性结合反应 大分子物质 二甲基亚砜 亚细胞定位 荧光显微镜 定量分析 分子物质 结构形态 内部器官 生物领域 微小动物 细胞水平 组织切片 组织细胞 体积比 乙醇 碱液 通透 定型 灵敏 定性 体内 细胞 观察 研究 | ||
【主权项】：
1.一种微型器官的处理方法，包括：采用体积比为1:1000的Tween‑20和0.01M PBS配置的处理液中轻微震荡微型器官4次，固定前1次，固定后透析前1次，透析后2次；依次将固定后的微型器官在透析液Ⅰ中1～10℃透析2～5天，在透析液Ⅱ中‑40～‑15℃透析4～8h，所述透析液Ⅰ配方为1M Tris碱液中含10%的Triton‑X 100、2%的BSA 以及0.05M 的NaCl，pH 6.8；透析液Ⅱ配方为体积比为4:1的乙醇和二甲基亚砜(DMSO)；所述微型器官是指动物体内的微型器官，厚度在1mm以下。
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