[发明专利]一种同时检测多种肿瘤标志物的3D折叠纸基微流体荧光检测装置有效
申请号: | 201710852160.2 | 申请日: | 2017-09-19 |
公开(公告)号: | CN107478631B | 公开(公告)日: | 2019-10-11 |
发明(设计)人: | 于海东;焦钰翠;李林;张承武;刘志鹏;刘金华;黄维;欧阳启然;赖琼宇;郭雪英;宗丽君;朱成显 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N33/533;G01N33/574 |
代理公司: | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人: | 吴频梅 |
地址: | 210009 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明涉及一种同时检测多种肿瘤标志物的3D折叠纸基微流体荧光检测装置,属于生物检测技术领域。该检测装置可用于同时对多种肿瘤标志物的检测。本发明包括以下步骤:(1)纸基微流体芯片的制作;(2)纸基微流体芯片的预处理;(3)三维纸基同时检测的免疫反应程序;(4)荧光分析检测。本发明将纸基微流体分析平台与荧光检测结合起来,用于多种肿瘤标志物的同时检测。这种检测装置简单,便宜,便携,一次性,易于使用,为发展中国家和资源有限和偏远地区提供了有利的平台。 | ||
搜索关键词: | 一种 同时 检测 多种 肿瘤 标志 折叠 纸基微 流体 荧光 装置 | ||
【主权项】:
1.一种同时检测多种肿瘤标志物的3D折叠纸基微流体荧光检测装置,其特征在于:包括以下步骤:(1)纸基微流体芯片的制作; 在计算机上设计出3D纸基的图形,构成可折叠的三维亲水和疏水区域,用于同时检测多种肿瘤标志物,在纸基2、3两层增加检测区域孔的数目为2‑5 ,即可增加同时检测的标志物种类数为 2‑5,并用喷蜡打印机打印,放进烘箱烘烤一段时间,取出冷却至室温,将纸基沿着打印区域剪下,并进行三维折叠;(2)纸基微流体芯片的预处理;将烘烤好的纸基微流体芯片的第3层用等离子清洗机进行氧气等离子体处理,使纸表面的碳自由基形成氧自由基,导致醛基的产生,此目的是便于抗体在纸上的固定;(3)三维纸基同时检测的免疫反应程序;首先在等离子体处理过的纸基微流体芯片的第3层分别固定2‑5种肿瘤标志物的包被抗体,然后用阻隔液阻隔纸上的结合位点,在纸基微流体芯片的第2层加入对应的2‑5种肿瘤标志物的异硫氰酸荧光素标记抗体,将纸基微流体芯片的1、2两层对叠,在纸基微流体芯片的的第1层样品区加入待测抗原混合液,最后将三层全部对叠,进行免疫反应;(4)荧光分析检测;将纸基微流体芯片的第3层置于特定的激发光源下,根据可视化的荧光强弱评估2‑5种肿瘤标志物浓度,将第3层的纸基微流体芯片用荧光分光光度计测定发射波长峰值,可精确得出检测的2‑5种肿瘤标志物浓度。
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