[发明专利]猪流行性腹泻病毒TaqMan荧光定量RT‑PCR试剂盒及其检测方法在审
| 申请号： | 201710899036.1 | 申请日： | 2017-09-28 |
| 公开（公告）号： | CN107686864A | 公开（公告）日： | 2018-02-13 |
| 发明（设计）人： | 刘新生;张永光;王永录;方玉珍;周鹏;张巧玲 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司11279 | 代理人： | 席勇 |
| 地址： | 730010 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒TaqMan荧光定量RT‑PCR试剂盒及其检测方法，根据猪流行性腹泻病毒的N基因序列，设计并合成特异的引物和TanMan探针，通过对荧光定量反应条件的优化，建立了检测PEDV的TaqMan实时荧光定量RT‑PCR方法，该方法在108‑102copies/μL范围内具有良好的线性关系，灵敏度最低可检测到102copies/μL，其敏感性高，可特异性的快速检测猪流行性腹泻病毒；批内和批间重复变异系数均小于1％，重复性好。应用本发明对2015‑2017年采集的185份猪粪便样品进行检测，其阳性检出率为38.4％，而用常规RT‑PCR方法检测进行对照试验，其阳性检出率仅为26.3％。 | ||
| 搜索关键词： | 流行性 腹泻 病毒 taqman 荧光 定量 rt pcr 试剂盒 及其 检测 方法 | ||
【主权项】：
猪流行性腹泻病毒TaqMan荧光定量RT‑PCR试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含引物和探针；所述引物的序列为：正向引物：5'‑ACTACCTCGGAACAGGACCTCA‑3'；反向引物：5'‑AGACGCCTTTCTGACACCCA‑3'；所述探针的序列为：5'‑FAM‑CGCCGACCTCCGCTATAGGACTCGT‑BHQ1‑3'。
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