[发明专利]一种补体C3检测试剂盒的制备方法

摘要

本发明公开了一种补体C3检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤(1)按试剂R1的组分含量，配制成R1缓冲液；将聚乙二醇8000、EDTA‑Na、叠氮钠溶于R1缓冲液，再用1mol/L盐酸或氢氧化钠调pH至8.5，得试剂R1；(2)按试剂R2的组分含量，配制R2缓冲液；将BSA、EDTA‑Na、Tween‑20、络蛋白、蔗糖、NaCl、叠氮钠溶于R2缓冲液，得R2分散液；制备聚苯乙烯乳胶微粒包被的抗人C3抗体；用R2分散液溶解聚苯乙烯乳胶微粒包被的抗人C3抗体，再用1mol/L盐酸或氢氧化钠调pH至7.4，得试剂R2。本发明优点为制备得到的试剂盒具有较高的灵敏度和稳定性，且操作简单、快速。

主权项

一种补体C3检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)按照下列组分含量配制试剂R1：试剂R1：其溶剂为纯化水；①按照上述试剂R1的组分含量，将Tris溶于纯化水中，搅拌均匀，待充分溶解，配制成R1缓冲液；②按照上述试剂R1的组分含量，将聚乙二醇8000、EDTA‑Na、叠氮钠溶于R1缓冲液中，搅拌均匀，再用1mol/L盐酸或氢氧化钠调pH至8.5，即制得试剂R1；(2)按照下列组分含量配制试剂R2：试剂R2：其溶剂为纯化水；①按照上述试剂R2的组分含量，将Tris溶于纯化水中，搅拌均匀，待充分溶解，配制成R2缓冲液；②按照上述试剂R2的组分含量，将BSA、EDTA‑Na、Tween‑20、络蛋白、蔗糖、NaCl、叠氮钠溶于R2缓冲液中，搅拌均匀，得R2分散液；③制备聚苯乙烯乳胶微粒包被的抗人C3抗体：a.将聚苯乙烯乳胶用PB缓冲液稀释到浓度为1％‑5％，每毫升体积溶液中加入EDAC 1.6mg，室温反应2h，10000‑20000rpm转速下离心30‑40min，去上清，将沉淀悬浮于MES缓冲液中，超声分散；b.再于10000‑20000rpm转速下离心30‑40min，弃上清，将沉淀悬浮于PB缓冲液中，使其中的聚苯乙烯乳胶颗粒最终浓度为3.0％，超声分散；接着，边搅拌边加入等体积的含抗人C3抗体的PB稀释液，混合搅拌，室温反应2h，其中的胶乳颗粒最终浓度为1.5％；c.10000‑20000rpm转速下离心30‑40min，弃上清，沉淀悬浮PB缓冲液中，超声分散，加入BSA，4℃封闭过夜，离心去上清后，得最终所需的聚苯乙烯乳胶微粒包被的抗人C3抗体；④用R2分散液来溶解得到的聚苯乙烯乳胶微粒包被的抗人C3抗体，使其中的胶乳颗粒终浓度为0.1‑2.0％，超声分散，再用1mol/L盐酸或氢氧化钠调pH至7.4，最终制得试剂R2。