[发明专利]一种黄曲霉毒素B1毒性的检测方法有效
申请号: | 201710934861.0 | 申请日: | 2017-09-28 |
公开(公告)号: | CN107462699B | 公开(公告)日: | 2018-06-12 |
发明(设计)人: | 熊江林;吴灵英;王锐;刘玉兰;周华林 | 申请(专利权)人: | 武汉轻工大学 |
主分类号: | G01N33/50 | 分类号: | G01N33/50 |
代理公司: | 深圳市世纪恒程知识产权代理事务所 44287 | 代理人: | 胡海国 |
地址: | 430023 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开一种黄曲霉毒素B1毒性的检测方法,包括如下步骤:配制含有不同黄曲霉毒素B1浓度的培养液;用含有不同黄曲霉毒素B1浓度的培养液培养斑马鱼胚胎24~120h;观察记录斑马鱼胚胎的死亡率,以及由斑马鱼胚胎孵化的斑马鱼幼鱼的孵化率、畸形率、心包囊和卵黄囊面积、幼鱼体面积,计算心包囊/幼体面积比和卵黄囊/幼体面积比,判断黄曲霉毒素B1对斑马鱼胚胎的毒性作用。本发明以斑马鱼为试验对象进行黄曲霉毒素B1的检测,能够快速获得大量同质性好的试验动物,降低试验成本,且容易观察中毒症状,可实时直观地观测鱼体各组织的病理变化,提高了黄曲霉毒素B1检测的效率、直观性和准确性。 | ||
搜索关键词: | 黄曲霉毒素 斑马鱼胚胎 心包 斑马鱼 卵黄囊 面积比 幼鱼 检测 培养液 黄曲霉毒素B1检测 培养液培养 病理变化 毒性作用 试验成本 试验动物 试验对象 中毒症状 孵化率 畸形率 直观性 观察 鱼体 配制 死亡率 观测 孵化 直观 记录 | ||
【主权项】:
一种黄曲霉毒素B1毒性的检测方法,其特征在于,包括如下步骤:将成年斑马鱼按照雌雄比为1:2~1:3的比例移至产卵盒;将产卵盒放入恒温箱中保温过夜后,自然交配并收集受精卵;将受精卵放入恒温箱中进行恒温培养后,在解剖镜下挑选发育正常的原肠胚作为斑马鱼胚胎;配制含有不同黄曲霉毒素B1浓度的培养液;用含有不同黄曲霉毒素B1浓度的培养液培养斑马鱼胚胎24~120h;观察记录斑马鱼胚胎的死亡率,以及由斑马鱼胚胎孵化的斑马鱼幼鱼的孵化率、畸形率、心包囊和卵黄囊面积、幼鱼体面积,计算心包囊/幼体面积比和卵黄囊/幼体面积比,判断黄曲霉毒素B1对斑马鱼胚胎的毒性作用;其中,所述成年斑马鱼的饲养饵料为热带小鱼饲料和丰年虫,所述斑马鱼幼鱼的饲养饵料为草履虫。
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