[发明专利]一种肠道和粪便中短链脂肪酸的检测方法有效
| 申请号： | 201710942505.3 | 申请日： | 2017-10-11 |
| 公开（公告）号： | CN107727783B | 公开（公告）日： | 2019-12-03 |
| 发明（设计）人： | 贾益群;刘娟;刘新华;陈龙;潘凌云;王夏雷;詹美榕;李云鹤 | 申请（专利权）人： | 上海中医药大学 |
| 主分类号： | G01N30/88 | 分类号： | G01N30/88 |
| 代理公司： | 31253 上海精晟知识产权代理有限公司 | 代理人： | 冯子玲<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 201203 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种肠道和粪便中短链脂肪酸的固相动态微萃取气质联用检测方法，包括以下步骤：称取肠道内容物40mg或粪便100mg，置于顶空瓶中，加入纯水1ml，涡旋振荡混匀；将所得的样品用于固相动态微萃取后用于气相色谱和质谱分析；并建立标准曲线进行定量分析。本发明的方法简化了样品的前处理步骤。只需将样本在纯水中均质，SPDE直接进行萃取，气相色谱与质谱联用分析，不需其他前处理步骤，能显著缩短测定时间，减轻实验工作量。本发明的方法的日内精密度RSD在5.29～9.92％，检出限在0.5～5μg·Kg‑1，最小测定限在1～20μg·Kg‑1。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 肠道 粪便 中短链 脂肪酸 检测 方法 | ||
【主权项】：
1.一种肠道和粪便中短链脂肪酸的固相动态微萃取气质联用检测方法，其特征在于，包括如下步骤：/n(1)称取肠道内容物40mg或粪便100mg，置于顶空瓶中，加入纯水1mL，涡旋振荡混匀；/n(2)将步骤(1)所得的样品用于固相动态微萃取；/n(3)将步骤(2)所得的产物用于气相色谱分析，条件为：色谱柱为VF-WAXms，0.25mm×30m，0.25μm；升温程序为，初始温度70℃，保持lmin，按10℃/min升温速率升温至200℃，保持2min，30℃/min升温速率升温至240℃，保持2min，进样口温度为250℃，载气是高纯度氦气，恒压进样，压力为14.135psi，流速为1.0mL/min，进样方式为不分流模式；/n(4)将步骤(3)所得产物用于质谱分析，条件为：扫描范围m/z:30—300，溶剂延迟时间7分钟，传输线、离子源温度分别是250，300℃，倍增器电压值为1853V；/n(5)标准曲线的建立，分别称取乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸和戊酸这6种短链脂肪酸，加入纯水定容，配置短链脂肪酸的对照品溶液，用峰面积对应样品浓度绘制标准曲线；/n所述固相动态微萃取的条件为：使用SPDE Syringe needle,coated withPolyethylenglycol,50μm,56mm、萃取次数50次、预热平衡时间为3分钟、预热平衡温度90℃、萃取针温度95℃、萃取流速200μL/s、解析气体体积为1mL；/n所述固相动态微萃取采用的萃取头涂层为聚乙二醇。/n
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