[发明专利]一种脂肪SVF细胞临床级高效制备和冻存的方法及其用途

摘要

本发明公开了一种脂肪SVF细胞临床级高效制备和冻存的方法及其用途，该制备方法包含：步骤S1：在无菌条件下采集脂肪样本，保存在保存液中，加入洗涤液对脂肪样本进行预处理；步骤S2：将预处理的脂肪样本离心，脂肪组织呈黄色，取出脂肪组织并加入等体积已预热的消化液，密封，在恒温条件下使脂肪组织和消化液混合均匀，消化至无大块组织块或虽有大块组织块但聚集大量脂质，离心；步骤S3：待步骤2离心结束，去除上层脂质，加入洗涤液将沉淀重悬混匀，过滤，再次添加洗涤液，离心，去除上清液，得到脂肪SVF细胞。本发明制备方法采用的洗涤液和消化液使得制备的脂肪SVF细胞的细胞数、细胞活率及纯度大幅度上升，保证提取的SVF细胞在临床治疗中的效果。

主权项

一种脂肪SVF细胞临床级高效制备方法，其特征在于，该制备方法包含：步骤S1：在无菌条件下式采集脂肪样本，保存在保存液中，加入洗涤液对脂肪样本进行预处理；步骤S2：将预处理的脂肪样本离心，脂肪组织呈黄色，取出脂肪组织并加入等体积已预热的消化液，密封，在恒温条件下使脂肪组织和消化液混合均匀，消化至无大块组织块或虽有大块组织块但聚集大量脂质，离心；步骤S3：待步骤2离心结束，去除上层脂质，加入洗涤液将沉淀重悬混匀，过滤，再次添加洗涤液，离心，去除上清液，得到脂肪SVF细胞；在步骤S1中，所述的洗涤液包含：生理盐水和人血白蛋白；在步骤S2中，所述的消化液包含：人血白蛋白、0.9%生理盐水、氯化镁和混合胶原酶，所述的混合胶原酶的质量：人血白蛋白的体积：0.9%生理盐水的体积为1mg：1mL：15mL。