[发明专利]一种检测环境中真菌毒素的方法有效
申请号: | 201710967376.3 | 申请日: | 2017-10-17 |
公开(公告)号: | CN107515295B | 公开(公告)日: | 2020-03-06 |
发明(设计)人: | 黄大伟;秦品珠;徐子昊;马倩慧;邴永鑫;洪伟;崔恺;郑文丽;张政科;于晓巍 | 申请(专利权)人: | 环境保护部华南环境科学研究所 |
主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53 |
代理公司: | 南京申云知识产权代理事务所(普通合伙) 32274 | 代理人: | 邱兴天 |
地址: | 510000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测环境中真菌毒素的方法,包括:荧光染料标记aptamer识别探针,aptamer与待测真菌毒素配体特异结合,制备纳米颗粒修饰的捕获探针,未反应的aptamer探针与磁性纳米颗粒修饰的探针发生杂交反应;磁性分离,测定上清液中荧光信号强弱判断与aptamer结合的真菌毒素的量;对磁性分离后的杂交体,进行解链,水洗,再磁性分离,实现磁性纳米颗粒标记探针的再生。本发明的方法,整个检测过程时间短,操作步骤简单快捷,具体反应步骤没有用到大型仪器,较易于推广。可重复利用,节约资源,同时省去制备捕获探针的步骤,使得检测更加快捷简单,检测限低,特异性好,具有很好的实用性。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 环境 真菌 毒素 方法 | ||
【主权项】:
一种检测环境中真菌毒素的方法,其特征在于,具体步骤如下:1)用荧光染料标记从核酸分子文库中得到的寡核苷酸片段,得到荧光染料标记的aptamer识别探针,将荧光染料标记的aptamer识别探针加入待测样品中,aptamer与待测真菌毒素配体特异结合,其中,荧光染料标记的aptamer识别探针过量;2)用生物素标记从核酸分子文库中得到的寡核苷酸片段互补碱基(即aptamer’),再用磁性纳米颗粒修饰,得到纳米颗粒修饰的捕获探针;3)将纳米颗粒修饰的捕获探针加入到待测样品中,未反应的aptamer识别探针与磁性纳米颗粒修饰的捕获探针发生杂交反应;磁性分离后,通过测定上清液中荧光信号强弱判断与aptamer结合的真菌毒素的量;4)通过磁性分离后的杂交体,解链,水洗,再磁性分离,即可实现磁性纳米颗粒标记探针的再生。
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