[发明专利]一种大花蕙兰倍数体化生产方法

摘要

本发明公开了一种大花蕙兰倍数体化生产方法，将经过无菌播种形成的大花蕙兰原球茎，在原球茎开始萌发有芽尖冒出但是新芽还没有长成时1‑4天内，切除萌发的芽尖后将原球茎移植到PG液体培养基中；将烧瓶放在培养架上的震荡器的苗床上震荡，光照下培养7日，再依次添加秋水仙素原液、萘乙酸原液和6‑苄氨基腺嘌呤原液到液体培养基中；密封烧瓶，继续放在培养架上的震荡器的苗床上震荡，光照下培养7日，再将烧瓶中的原球茎过滤取出，用无菌水将残存原液洗净；最后原球茎移植到CS固体培养基中进行培养，培养2个月后即可萌发出4倍体的大花蕙兰新苗；具有处理方便、成功率高、时间短、成本低、无污染等优点。

主权项

一种大花蕙兰倍数体化生产方法，包括下列步骤：(1)将经过无菌播种形成的大花蕙兰原球茎，在原球茎开始萌发有芽尖冒出但是新芽还没有长成时1‑4天内，切除萌发的芽尖后将原球茎移植到PG液体培养基中；(2)将移植好的原球茎烧瓶放在培养架上的震荡器的苗床上震荡，光照下培养，培养条件为：温度：22‑25℃，光照强度：2000‑2800lx，每日光照16小时；(3)按步骤(2)所述方法培养7日后，用5ml的注射器吸入秋水仙素原液，加装Ф13mm/0.22um一次性水系针头过滤器，添加过滤除菌后的秋水仙素原液1～2ml到液体培养基中；(4)用5ml的注射器吸入萘乙酸原液，加装Ф13mm/0.22um一次性水系针头过滤器，添加过滤除菌后的萘乙酸原液1～2ml到液体培养基中；(5)用5ml的注射器吸入6‑苄氨基腺嘌呤原液，加装Ф13mm/0.22um一次性水系针头过滤器，添加过滤除菌后的6‑苄氨基腺嘌呤原液1～2ml到液体培养基中；(6)依次添加完秋水仙素原液、萘乙酸原液和6‑苄氨基腺嘌呤原液后，密封烧瓶，将原球茎烧瓶放在培养架上的震荡器的苗床上震荡，光照下培养，培养条件为：温度：22‑25℃，光照强度：2000‑2800lx，每日光照16小时；(7)按步骤(6)所述方法培养7日后，将烧瓶中的原球茎过滤取出，用无菌水将残存的秋水仙素、萘乙酸原液和6‑苄氨基腺嘌呤原液洗净；(8)将洗净后的原球茎移植到CS固体培养基中进行培养，培养条件为：温度：24‑25℃，光照强度：2000‑2800lx,每日光照16小时进行培养，培养2个月后即可萌发出4倍体的大花蕙兰新苗。