[发明专利]复方大黄清胰汤指纹图谱的建立方法

摘要

复方大黄清胰汤指纹图谱的建立方法，步骤：供试品溶液、单味药材供试品溶液和对照品溶液的制备，HPLC色谱条件的确定，指纹图谱的确定；所述高效液相色谱条件为UItimate LP‑C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm），流速1.0 mL/min，柱温30℃，检测波长237 nm，乙腈(A)－0.1%磷酸溶液(B)，梯度洗脱。本发明采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版》建立的复方大黄清胰汤剂指纹图谱，由42个共有峰色谱信息构成，并通过与各组方药材及对照品保留时间和紫外光谱图比对，对共有峰进行归属并指认了部分色谱峰，改变了单一成分或其中几种有效成分进行质量控制的技术手段。

主权项

复方大黄清胰汤指纹图谱的建立方法，其特征在于：它包括以下步骤：步骤一：制备对照品溶液：分别配制栀子苷、芍药苷、丹皮酚、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、和厚朴酚、厚朴酚、木香烃内酯、去氢木香烃内酯、延胡索乙素对照品储备溶液；再分别精密取上述对照品储备液，加甲醇溶液制得每1 mL含栀子苷、芍药苷、丹皮酚、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、和厚朴酚、厚朴酚、木香烃内酯、去氢木香烃内酯、延胡索乙素分别为6～100μg的混合对照品溶液；步骤二：制备供试品溶液：称取清胰汤Ⅱ号于离心管中，加入适量甲醇，称定重量，超声，放冷，甲醇补足减少的重量，离心，取全部上清，挥去溶剂，残渣加甲醇溶解并定容至一定体积，摇匀，滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液；同法分别制备大黄、赤芍、木香、丹皮、厚朴、栀子、延胡索单味药材供试品溶液；步骤三：对供试品溶液和混合对照品溶液进行高效液相色谱分析；分别精密吸取样品溶液与参照物溶液各10μL，注入液相色谱仪测定，记录150min图谱；高效液相色谱条件如下：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长为220~400nm；柱温为25~40 ℃; 流速为0 .8~1 .2 mL/min；流动相A和B分别为，甲醇－水、甲醇－0.2v/v％冰醋酸水溶液、甲醇－0.2%磷酸水溶液、乙腈－水、乙腈－0 .1v/v％磷酸水溶液、乙腈－0 .2v/v％磷酸水溶液、乙腈－0 .1v/v％冰醋酸水溶液、乙腈－0 .1v/v％甲酸水溶液；流动相进行梯度洗脱，洗脱程序以如下体积浓度配制进行：0～100min，2%～30% 流动相A，98%～70% 流动相B； 100～150 min，30%～85%流动相 A，70%～15%流动相 B。