[发明专利]一种黄花白芨的鉴别方法有效
申请号: | 201710986339.7 | 申请日: | 2017-10-20 |
公开(公告)号: | CN107523644B | 公开(公告)日: | 2021-01-26 |
发明(设计)人: | 刘红美;张洁;刘显义;张婷婷;曾丽娜 | 申请(专利权)人: | 贵州医科大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895 |
代理公司: | 贵阳索易时代知识产权代理事务所(普通合伙) 52117 | 代理人: | 管宝伟 |
地址: | 550025 贵*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | 本发明公开了一种黄花白芨的鉴别方法,属于中药材鉴别技术领域,该方法包括以下步骤:挑选一批不同种类的黄花白芨和紫花白芨,采用CTAB方法分别抽提白芨个体基因组DNA,然后设计引物对白芨核糖体大亚基基因的D1‑D3区DNA序列进行扩增、克隆、测序和序列比对,确定待测SNP位点;进而针对待测SNP位点设计特异性的PCR扩增引物进行PCR扩增,验证SNP位点,得出标准数据;最后采用PCR扩增引物对待测样本的DNA进行扩增,并根据扩增产物在PCR扩增电泳图中目的条带的有无确定待测样本的SNP位点基因型,与标准数据相比较,从而判定待测样品是黄花白芨还是紫花白芨。 | ||
搜索关键词: | 一种 黄花 白芨 鉴别方法 | ||
【主权项】:
一种黄花白芨的鉴别方法,其特征在于,包括以下步骤:a、挑选种植时间相同的黄花白芨和紫花白芨各3株,采用CTAB方法分别抽提个体基因组DNA;b、设计引物分别对3株紫花白芨DNA和3株黄花白芨DNA的核糖体大亚基基因的D1‑D3区DNA序列进行扩增、克隆、测序和序列比对,当3株紫花白芨和3株黄花白芨都出现SNP位点时,确定该待测SNP位点;c、针对SNP位点设计特异性的PCR扩增引物,将PCR扩增引物中的正向引物或反向引物的3'末端对应待测SNP进行扩增,验证该SNP位点,得出SNP位点标准基因数据;d、采用PCR扩增引物对待测样本的DNA进行扩增,并根据扩增产物在PCR扩增电泳图中目的条带的有无确定待测样本SNP位点基因型,将此基因与标准基因数据相比较,从而判定待测样品是黄花白芨还是紫花白芨。
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