[发明专利]一种表征卷烟烟气对口腔收敛感影响的体外方法

摘要

本发明涉及一种表征卷烟烟气对口腔收敛感影响的体外方法，属于生物应用技术领域。该方法包括卷烟的主流烟气总粒相物的提取、人工唾液的配制、TPM上清的制备、染色、蛋白质含量的测定等步骤。本发明的方法操作简单，利用唾液蛋白沉淀会产生收敛感的原理，采用唾液淀粉酶模拟唾液中的蛋白环境，用其沉淀比例来定量表征收敛感的大小。且采用体外抽吸捕集烟气总粒相物再与唾液淀粉酶进行反应，通过这一浓缩过程放大烟气对唾液淀粉酶的影响效果，从而比较出不同卷烟烟气的细微差异，可用于卷烟烟气对口腔收敛感的定量表征，为卷烟烟气的感官评价提供参考。

主权项

一种表征卷烟烟气对口腔收敛感影响的体外方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤（1），选取重量和吸阻一致的烟支作为待表征样品，平衡后使用全自动转盘式吸烟机抽吸10‑20支卷烟，用剑桥滤片捕集烟气总粒相物；之后剑桥滤片用DMSO浸泡，超声波提取TPM，最后用DMSO定容至10g TPM/mL DMSO，得到TPM溶液，‑80℃低温保存，备用；步骤（2），配制含1mg/mL唾液淀粉酶的人工唾液，离心，取上清，得到唾液上清；步骤（3），按照体积比为1：9的比例，将步骤（1）得到的TPM溶液加入步骤（2）得到的唾液上清中，于37℃下孵育10min后取出，离心，取上清，得到TPM上清；步骤（4），分别向步骤（2）得到的唾液上清、步骤（3）得到的TPM上清中加入考马斯亮蓝G‑250溶液，混匀，室温放置10min，得到染色唾液上清和染色TPM上清；其中，向步骤（2）得到的唾液上清中加入考马斯亮蓝G‑250溶液的体积为唾液上清体积的19倍；向步骤（3）得到的TPM上清中加入考马斯亮蓝G‑250溶液的体积为TPM上清体积的19倍；步骤（5），用分光光度计分别测定步骤（4）得到的染色唾液上清和染色TPM上清在595 nm处的吸光值，根据蛋白标准曲线，计算染色唾液上清和染色TPM上清中蛋白质含量；步骤（6），根据步骤（5）得到的染色唾液上清和染色TPM上清中蛋白质含量，计算唾液淀粉酶沉淀比例；唾液淀粉酶沉淀比例=（染色唾液上清蛋白质含量‑染色TPM上清中蛋白质含量）÷染色唾液上清蛋白质含量；该沉淀比例即为待表征样品的收敛感。