[发明专利]一种从平卧菊三七中制备高纯度绿原酸的方法

摘要

本发明公开一种从平卧菊三七中制备高纯度绿原酸的方法，其以平卧菊三七的叶为原料，将平卧菊三七叶切分、烘干、粉碎，过筛，得到平卧菊三七叶粉末，平卧菊三七叶粉末采用微波辅助提取得到绿原酸粗提物，采用高效液相色谱法对绿原酸粗提物中的绿原酸含量进行测定，再通过中高压制备液相色谱法分离纯化绿原酸粗提物，能够分离得到纯度高、回收率高的绿原酸的单体。本发明分离效率高，处理量大，生产周期短以及分析方法重复性好，为平卧菊三七中高纯度绿原酸的工业化生产提供了有效的技术支持。

主权项

一种从平卧菊三七中制备高纯度绿原酸的方法，其特征是：其包括以下步骤：步骤1、预处理：以平卧菊三七的叶为原料，将平卧菊三七叶按长度为30mm～40mm进行切分，然后置于恒温干燥箱中40～60℃干燥30～40min，干燥后平卧菊三七叶含水量保持在初始重量55%～70%，再进行粉碎，过40～80目筛，得到平卧菊三七叶粉末；步骤2、粗提取：将步骤1得到的平卧菊三七叶粉末加入65～75%甲醇水溶液中，采用微波辅助提取，平卧菊三七叶粉末与甲醇水溶液的料液比1：20～50g/ml，提取温度50～80℃，提取时间为30～70min，提取功率为400～600W，过滤，得到提取液，提取液即为绿原酸粗提取物，绿原酸提取率为2.50～3.58 %；步骤3、检测：将绿原酸对照品用流动相稀释制备对照品溶液，对步骤2得到的绿原酸粗提取物取样，样品用流动相稀释后，再通过孔径为0.45μm～0.60μm的滤膜过滤，滤液即为供试品溶液；将对照品溶液、供试品溶液分别进行HPLC分析，HPLC色谱条件：ODS C18色谱柱，4.6mm×250mm，5μm；流动相为乙腈‑0.5%乙酸水溶液，乙腈与乙酸水溶液体积比为10：90；检测波长327nm；流速0.5～1.0mL/min；进样量为20μL；柱温为30℃；根据液相色谱结果，以样品峰面积与对照品峰面积比较来测定绿原酸含量；步骤4、分离纯化：步骤2得到的绿原酸粗提取物，经MCI树脂柱分离，获得洗脱液，洗脱液用中高压制备液相色谱分离纯化，制备色谱的分离条件：ODS C18色谱柱，920mm ×70mm；流动相为甲醇和水，甲醇和水的体积比35～45:55～70，梯度洗脱，流速为10～15 mL/min，检测波长327 nm，进样量为10～20mL；收集含有绿原酸的洗脱液，再通过减压蒸馏、真空干燥得到白色粉末状绿原酸，绿原酸单体纯度为93.24～95.85%，回收率为75.22～80.67%。