[发明专利]一种基于毛细管电泳技术鉴定易成花荔枝种质资源的方法

摘要

本发明属于荔枝遗传育种技术领域，具体涉及一种基于毛细管电泳技术鉴定易成花荔枝种质资源的方法。申请者根据两个类型LcFT1基因的差异开发一对引物LcCeED‑F和LcCeED‑R，并基于毛细管电泳技术鉴定易成花荔枝种质资源。本发明的方法可在DNA水平上对易成花荔枝种质资源进行鉴定，具有方法简便、效率高、鉴定结果准确以及不受外界环境影响等特点，在今后荔枝育种中具有广泛的应用前景。

主权项

一种基于毛细管电泳技术鉴定易成花荔枝种质资源的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)提取待检测荔枝的DNA；(2)PCR扩增：以待检测的荔枝DNA为模板，以上游引物LcCeED‑F和下游引物LcCeED‑R进行PCR扩增；(3)PCR产物毛细管电泳检测：取1μL的PCR产物分别加入9μL的去离子甲酰胺和1μL的GS3730‑500分子量内标，95℃预变性5min，4℃再保温10min，然后通过ABI3730XL DNA分析仪进行毛细管电泳，再用GeneMarker V1.91 Demo软件进行分析生成图谱；(4)易成花荔枝种质资源的鉴定分析：以待检测的荔枝DNA样品为模板进行PCR扩增，PCR扩增产物经毛细管电泳检测，如果在674bp处出现单一峰值，则表明待检测荔枝为LcFT1基因纯合低温敏感型易成花荔枝种质资源；如果在659bp和674bp处同时出现两个峰值，则表明待检测荔枝为LcFT1基因低温敏感型和低温不敏感型的杂合易成花荔枝种质资源；如果在659bp处出现单一峰值，则表明待检测荔枝为LcFT1基因纯合低温不敏感型荔枝种质资源。