[发明专利]一种同时测定丹参中6种内源激素含量的HPLC方法

摘要

本发明提供了一种同时测定丹参中多种内源激素含量的HPLC方法，步骤如下：a、制备供试品溶液；b、制备对照品溶液；c、分别将供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪检测；d、根据检测结果计算得到丹参中的各激素含量。本发明方法可以同时测定川丹参花中的6种内源激素，准确可靠、简便快速，为丹参的雄性不育机理研究提供了有效的理论依据，也为开展丹参雄蕊育性的外源激素调控、优选品种的选育奠定了良好基础。

主权项

1.一种同时测定丹参中多种内源激素含量的HPLC方法，其特征在于：步骤如下：a、制备供试品溶液：取丹参花，以甲醇为溶剂提取，离心、浓缩，再分别经石油醚、乙酸乙酯萃取，浓缩，用乙腈溶解、过滤，得供试品溶液；b、制备对照品溶液：取各激素对照品，混合，加乙腈溶解，配制成混合对照品溶液；c、分别将供试品溶液和对照品溶液注入高效液相色谱仪检测，色谱条件如下：色谱柱：C18色谱柱；流动相：流动相A为体积分数为0.1%的磷酸水溶液，B为乙腈，梯度洗脱程序为：0~15 min，5%~10% B：15~30 min，10%~25% B；30~40 min，25%~35% B；40~42 min，35%~40% B；检测波长：分别为210 nm和254nm；d、根据检测结果计算得到丹参花中的各激素含量；所述内源激素为玉米素、玉米素核苷、激动素、生长素、赤霉素和脱落酸；步骤a中，以甲醇为溶剂提取的方法为：取丹参花1重量份，研磨后，加入PVPP 0.2重量份、体积分数为80%的甲醇溶液30体积份，4℃放置24h，得上清液备用；将沉淀用体积分数为80%的甲醇溶液研磨分两次提取，每次30min；提取液与上清液合并待用。