[发明专利]一种在单分子水平同时检测多种DNA糖基化酶的荧光化学传感器及其检测方法和应用有效
申请号: | 201711027692.9 | 申请日: | 2017-10-27 |
公开(公告)号: | CN107723338B | 公开(公告)日: | 2020-03-27 |
发明(设计)人: | 张春阳;胡娟;刘明昊 | 申请(专利权)人: | 山东师范大学 |
主分类号: | C12Q1/44 | 分类号: | C12Q1/44;C12Q1/34;C12N15/11;G01N21/64 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 王志坤 |
地址: | 250014 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种在单分子水平同时检测多种DNA糖基化酶的荧光化学传感器及其检测方法和应用,该传感器基于修饰有8‑羟基鸟嘌呤且尾端标记花菁3(Cy3)和猝灭基团的分子信标以及修饰有脱氧次黄嘌呤且尾端标记花菁5(Cy5)和猝灭基团的两种不同的分子信标用于检测8‑羟基鸟嘌呤DNA糖基化酶和N‑甲基嘌呤DNA糖基化酶,与受动力学和热力学影响严重的传统分子信标不同,Cy3和Cy5的信号恢复取决于DNA糖基化酶为媒介的分子信标劈裂,该方法在不涉及任何信号扩增的情况下能够实现同时灵敏检测对hOGG1和hAAG活性的超灵敏检测,操作简便、快速,试验结果准确、可靠。 | ||
搜索关键词: | 一种 分子 水平 同时 检测 多种 dna 糖基化酶 荧光 化学 传感器 及其 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种同时检测hOGG1和hAAG的荧光化学传感器,其特征在于,所述荧光化学传感器包括:hOGG1分子信标和hAAG分子信标;其中,所述hOGG1分子信标为一个具茎环结构的发夹DNA探针,两条茎结构互补形成双链DNA,所述双链DNA具有hOGG1的识别位点;所述分子信标的茎结构两个末端分别用荧光基团I和淬灭基团I标记;所述hOGG1的识别位点为8‑羟基鸟嘌呤/胞嘧啶碱基对;所述hAAG分子信标为一个具茎环结构的发夹DNA探针,两条茎结构互补形成双链DNA,所述双链DNA具有hAAG的识别位点;所述分子信标的茎结构两个末端分别用荧光基团II和淬灭基团II标记;所述hAAG的识别位点为脱氧次黄嘌呤/胸腺嘧啶碱基对。
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