[发明专利]一种分离鸡胚生殖嵴来源的原始生殖干细胞方法在审
| 申请号： | 201711034939.X | 申请日： | 2017-10-30 |
| 公开（公告）号： | CN107779428A | 公开（公告）日： | 2018-03-09 |
| 发明（设计）人： | 李碧春;靳锴;左其生;张亚妮 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12N5/0735 | 分类号： | C12N5/0735 |
| 代理公司： | 扬州苏中专利事务所(普通合伙)32222 | 代理人： | 许必元 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种分离鸡胚生殖嵴来源的原始生殖干细胞方法，属于生物技术领域，包括以下步骤（1）无菌取出21‑24HH早期胚胎，使用PBS浸洗3次；（2）在解剖显微镜下去头尾，剥离出生殖嵴，获取早期生殖嵴组织，使用PBS浸洗3次；（3）加入预热的胰蛋白酶进行消化，室温消化5mins，消化时轻轻吹打使生殖嵴组织分散；（4）加入含有小牛血清的培养基终止消化，100目网筛过滤后300转离心5mins，弃上清后使用PGCs培养基进行重悬，重悬后进行差速贴壁培养，培养45mins后吸上清，连续差速贴壁培养3次后即可得到纯度较高的PGCs。本发明提取简便快速，旨在从早期生殖嵴（21‑24HH）中分离大量纯净且全能性高的PGCs，为PGCs的应用奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 分离 生殖 来源 原始 干细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种分离鸡胚生殖嵴来源的原始生殖干细胞方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）无菌取出21‑24HH早期胚胎，使用PBS浸洗3次；（2）在解剖显微镜下去头尾，剥离出生殖嵴，获取早期生殖嵴组织，使用PBS浸洗3次；（3）加入预热的胰蛋白酶进行消化，室温消化5mins，消化时轻轻吹打使生殖嵴组织分散；（4）加入含有小牛血清的培养基终止消化，100目网筛过滤后300转离心5mins，弃上清后使用PGCs培养基进行重悬，重悬后进行差速贴壁培养，培养45mins后吸上清，连续差速贴壁培养3次后即可得到纯度较高的PGCs。
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