[发明专利]利用胸腹水组织提取DNA的方法及试剂盒在审
| 申请号： | 201711057278.2 | 申请日： | 2017-11-01 |
| 公开（公告）号： | CN109750028A | 公开（公告）日： | 2019-05-14 |
| 发明（设计）人： | 臧德山 | 申请（专利权）人： | 杭州瑞普基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 赵天月 |
| 地址： | 311121 浙江省杭州市*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用胸腹水组织提取DNA的方法及试剂盒。本发明提供了利用胸腹水组织提取DNA的方法，包括如下步骤：胸腹水前处理、细胞裂解、核酸吸附和磁性分离、蛋白去除以及核酸从磁珠上释放的过程。本发明还提供了依据以上方法制备得到的试剂盒。采用本发明的方法和试剂盒能高效、快速地获得高质量DNA，可以满足PCR扩增、定量和定性分析、测序等分子生物学实验的要求，对诊断胸腹水产生的相关疾病具有应用价值，为胸腹水组织中DNA的制备提供了新的思路。 | ||
| 搜索关键词： | 胸腹水 试剂盒 提取DNA 制备 分子生物学实验 生物技术领域 定性分析 高质量DNA 磁性分离 蛋白去除 核酸吸附 细胞裂解 前处理 测序 磁珠 核酸 诊断 释放 疾病 应用 | ||
【主权项】：
1.一种利用胸腹水组织提取DNA的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)胸腹水前处理：无菌条件下抽取胸腹水组织样本，加入抗凝剂混匀，离心得到胸腹水沉淀，然后加入缓冲液，混匀得到混合溶液；2)细胞裂解：向步骤1)中的混合溶液中加入蛋白酶和裂解液，混匀后置于进行温育至细胞组织消化完全；3)加入结合液，混匀后进行温育，然后加入异丙醇混匀；4)磁珠吸附和分离：加入磁珠混匀，孵育，然后将孵育好的溶液置于磁性分离装置上，进行磁性分离；5)蛋白去除：向步骤4)中加入去蛋白液，混匀后去除蛋白；6)核酸从磁珠上释放：加入洗脱液，混匀后，然后吸取上清，得到胸腹水组织DNA。
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