[发明专利]一种快速鉴别飞虱种类的多重PCR试剂盒及其鉴别方法

摘要

一种快速鉴别飞虱种类的多重PCR试剂盒及其鉴别方法，属于分子生物学鉴别技术领域。包括1）3条上游引物和3条下游引物；2）阳性对照重组质粒模板；3）PCR反应液。上述一种快速鉴别飞虱种类的多重PCR试剂盒及其鉴别方法，其针对三种飞虱的ITS序列，在验证ITS区序列的基础上，设计并优化了引物对及配比，以粗组织样品为模板，节省了提取DNA的所耗费的时间和试剂，建立了更加快速、准确、灵敏、高通量、低成本地鉴别三种飞虱的多重PCR检测试剂盒及鉴别方法，为分子生物学方法鉴别褐飞虱、拟褐飞虱和伪褐飞虱提供选择。

主权项

一种快速鉴别飞虱种类的多重PCR试剂盒，其特征在于包括： 1）3条上游引物和3条下游引物； 2）阳性对照重组质粒模板； 3）PCR反应液；其中，所述的3条上游引物和3条下游引物序列分别为：扩增褐飞虱的特异性引物的核苷酸序列为：Nl‑F: 5’‑ CAACTAGGTAAGTAAAGGTGCTAC ‑3’Nl‑R: 5’‑ GCTTGCTGTTAAGTCACAAG ‑3’扩增拟褐飞虱的特异性引物的核苷酸序列为：Nb‑F: 5’‑ GCTAGTCATTACATTGTATGTTGG ‑3’Nb‑R: 5’‑ ACTTTCTGGTCCGACTAACAT ‑3’扩增伪褐飞虱的特异性引物的核苷酸序列为：Nm‑F: 5’‑ TGTATGATGGCAGCATTAATCT ‑3’Nm‑R: 5’‑ GAAATTTGTATGGTTCAATGTGTAG ‑3’。