[发明专利]一种磷脂酰丝氨酸含量的检测方法有效
申请号: | 201711066602.7 | 申请日: | 2017-11-02 |
公开(公告)号: | CN107688073B | 公开(公告)日: | 2020-12-04 |
发明(设计)人: | 肖水水;张伟;王丽娜 | 申请(专利权)人: | 威海百合生物技术股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88 |
代理公司: | 济南日新专利代理事务所(普通合伙) 37224 | 代理人: | 李蕾蕾 |
地址: | 264321 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种磷脂酰丝氨酸含量的检测方法,其解决现有检测方法存在保留时间过长、峰形不佳的问题。其经过以下步骤:(I)绘制标准曲线:准确称取磷脂酰丝氨酸标样配成标准溶液,随后使用梯度洗脱条件进行高效液相色谱分离;(II)将待测样品制备成适合进行高效液相色谱进样的液体样品;(III)使用梯度洗脱高效液相色谱来分离待测样品,所述的梯度洗脱条件和步骤I的梯度洗脱条件相同;(IV)随后使用蒸发光散射检测器记录峰面积,并且按照步骤I得到的拟合方程来得到样品中的磷脂酰丝氨酸浓度。本发明采用高效液相色谱配合蒸发光检测器为该原料或成品的检测提供了一个准确快速、灵敏度高的检测方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 磷脂 丝氨酸 含量 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种磷脂酰丝氨酸含量的检测方法,其特征在于:其经过以下步骤:(I)绘制标准曲线:准确称取磷脂酰丝氨酸标样,并且溶于氯仿/甲醇溶液,配置成标准溶液,随后将4‑10组梯度体积的标准溶液进行高效液相色谱分离,所述的梯度洗脱条件是:高效液相色谱柱为球形硅胶正相柱;柱温为30‑40摄氏度;流动相A:正已烷、异丙醇、乙酸和三乙胺的体积比是810:160‑200:8‑12:0.6‑0.10;流动相B:异丙醇、水、乙酸和三乙胺的体积比是860: 110‑130:8‑12:0.6‑0.10;在0‑10分钟,流动相A和B的流速比为100:0;在10‑15分钟,流动相A和B的流速比为60:50‑30;在15‑20分钟,流动相A和B的流速比为0:100;随后使用蒸发光散射检测器记录峰面积,并且将峰面积对各组样品的浓度做出标准曲线,拟合出一元一次方程,所述的氯仿/甲醇溶液的氯仿体积分数为85‑95%;(II)将待测样品制备成适合进行高效液相色谱进样的液体样品;(III)使用梯度洗脱高效液相色谱来分离待测样品,所述的梯度洗脱条件和步骤I的梯度洗脱条件相同;(IV)随后使用蒸发光散射检测器记录峰面积,并且按照步骤I得到的拟合方程来得到样品中的磷脂酰丝氨酸浓度。
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