[发明专利]单链环状文库的构建方法有效
| 申请号： | 201711078817.0 | 申请日： | 2017-11-06 |
| 公开（公告）号： | CN109750086B | 公开（公告）日： | 2022-08-02 |
| 发明（设计）人： | 严海生;张通达;郭健 | 申请（专利权）人： | 深圳华大智造科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6806 | 分类号： | C12Q1/6806;C12N15/10;C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 518083 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了单链环状文库的构建方法。本发明公开的单链环状文库的构建方法包括：1)利用转座酶复合体打断靶DNA，得到DNA打断产物；转座酶复合体包括转座酶、接头A和接头B，A由捕获标签、序列表中序列1的第1‑16位和转座酶的识别序列依次连接得到单链DNA和识别序列的互补序列组成；接头B由识别序列和识别序列的互补序列组成；2)对DNA打断产物进行缺口平移，解链，利用捕获标签进行捕获得到含有捕获标签的单链DNA；3)将含有所述捕获标签的单链DNA环化，得到单链环状文库。本发明的方法工艺简洁，操作简单，不需要进行末端修复、加接头、单链分离等操作，可以缩短建库周期，提高建库效率。 | ||
| 搜索关键词： | 链环 文库 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.单链环状文库的构建方法，包括：1)利用转座酶复合体打断靶DNA，得到DNA打断产物；所述转座酶复合体包括转座酶和转座元件，所述转座元件由名称分别为A和B的接头组成；所述A由名称分别为a1和c1的单链DNA组成，所述a1由捕获标签、名称序列甲的单链DNA和所述转座酶的识别序列依次连接得到，所述序列甲为序列表中序列1的第1‑16位所示的单链DNA；所述c1为所述识别序列的互补序列；所述B由所述识别序列所示单链DNA以及所述c1组成；2)对所述DNA打断产物进行缺口平移，得到缺口平移产物；将所述缺口平移产物解链，利用所述捕获标签进行捕获得到含有所述捕获标签的单链DNA；3)将所述含有所述捕获标签的单链DNA环化，得到单链环状文库。
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