[发明专利]一种构建果蝇miRNA测序文库进行高通量测序的方法有效
| 申请号： | 201711107205.X | 申请日： | 2017-11-10 |
| 公开（公告）号： | CN108018341B | 公开（公告）日： | 2021-06-22 |
| 发明（设计）人： | 张锐;顾南南;李丽诗;宋玉龙 | 申请（专利权）人： | 中山大学;广州序深智能科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/6869 | 分类号： | C12Q1/6869;C12N15/11 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 陈卫 |
| 地址： | 510275 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种构建果蝇miRNA测序文库进行高通量测序的方法，包括如下步骤：S1.提取果蝇总RNA，反转成cDNA；S2.以cDNA为模板，用探针进行超高重PCR预扩增和超高重PCR扩增样品中的miRNA，同时在扩增产物两端分别接上3'接头和5'接头；S4.将mmPCR扩增产物连接标签序列；S5.将加上标签序列的样品进行凝胶电泳，回收纯化电泳产物，即构建好miRNA文库；S6.将得到的多个miRNA文库混合，利用二代测序技术进行高通量测序。本发明极大的提高了前体miRNA上RNA编辑和修饰的检测敏感性，以及RNA靶向测序文库的均一性，缩短了构建文库和测序周期，降低了成本，具有较大的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 构建 果蝇 mirna 序文 进行 通量 方法 | ||
【主权项】：
1.一种靶向扩增果蝇miRNA前体区域的探针，其特征在于，所述探针共247对，其序列依次如SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:494所示：
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