[发明专利]硫酸软骨素ABC酶蛋白的制备方法及其应用有效
| 申请号： | 201711120265.5 | 申请日： | 2017-11-14 |
| 公开（公告）号： | CN109777816B | 公开（公告）日： | 2021-05-14 |
| 发明（设计）人： | 李晔;陈振娅;周朝;辛秀兰;袁其朋 | 申请（专利权）人： | 北京电子科技职业学院 |
| 主分类号： | C12N15/60 | 分类号： | C12N15/60;C12N9/88;C12N15/70;C12N1/21 |
| 代理公司： | 郑州德勤知识产权代理有限公司 41128 | 代理人： | 王莉 |
| 地址： | 100020 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种ChSaseABC酶蛋白的制备方法，该方法包括：分别克隆所述硫酸软骨素ABC酶基因和分子伴侣蛋白GroES基因，然后连接上述两个蛋白基因到同一个表达载体，获得含有所述硫酸软骨素ABC酶蛋白和分子伴侣蛋白GroES的重组载体；将所述重组载体转化到宿主细胞中进行表达，获得含有所述硫酸软骨素ABC酶蛋白和分子伴侣蛋白GroES的转化体；以及培养所述转化体，并进行物理破碎处理，制得所述硫酸软骨素ABC酶蛋白。本发明还提供一种ChSase ABC酶蛋白及其应用。上述ChSase ABC酶蛋白具有高酶活，能够用于生产低分子量硫酸软骨素，并且硫酸软骨素的生成条件不高、方法简便且容易控制。 | ||
| 搜索关键词： | 硫酸 软骨素 abc 蛋白 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种硫酸软骨素ABC酶蛋白的制备方法，其包括以下步骤：1）重组载体：分别克隆所述硫酸软骨素ABC酶基因和分子伴侣蛋白GroES基因，然后连接上述两个蛋白基因到同一个表达载体，获得含有所述硫酸软骨素ABC酶蛋白和分子伴侣蛋白GroES的重组载体；2）获得转化体：将所述步骤1）得到的所述重组载体转化到宿主细胞中进行表达，获得含有所述硫酸软骨素ABC酶蛋白和分子伴侣蛋白GroES的转化体；以及3）制备硫酸软骨素ABC酶蛋白：培养所述步骤2）得到的所述转化体，并进行物理破碎处理，制得所述硫酸软骨素ABC酶蛋白。
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