[发明专利]重组肌红蛋白的制备方法有效
| 申请号： | 201711214207.9 | 申请日： | 2017-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN109836492B | 公开（公告）日： | 2022-07-22 |
| 发明（设计）人： | 邓盛元;崔宏达;郑晨昱 | 申请（专利权）人： | 南京理工大学 |
| 主分类号： | C07K14/805 | 分类号： | C07K14/805;C07K1/34 |
| 代理公司： | 南京理工大学专利中心 32203 | 代理人： | 刘海霞 |
| 地址： | 210094 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种重组肌红蛋白的制备方法。所述方法先通过在pH＝2.0的酸性条件下，蛋白质变性导致卟啉分离制备脱辅基肌红蛋白，再通过pH＝9.5的碱性条件下，脱辅基肌红蛋白复性与锌卟啉的结合制备重组蛋白。本发明制备方法工艺简单、易于控制，制得的重组肌红蛋白对于肌红蛋白能够发出稳定的较强的荧光，其荧光强度要远远强于原肌红蛋白。利用重组肌红蛋白可以制备荧光生物传感器，具有灵敏度高、选择性好等优点，可应用于生物医学研究、环境监测等领域。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 肌红蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.重组肌红蛋白的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：步骤1、制备脱辅基肌红蛋白：4℃条件下，取肌红蛋白溶于水中，用HCl溶液调节pH至2.0，静置，然后将溶液用等量丁酮萃取，直至上层丁酮无色为止，取下层浅红色脱辅基肌红蛋白溶液进行透析，低温高速离心取上清液，得到脱辅基肌红蛋白溶液；步骤2、制备重组肌红蛋白：取锌卟啉Zn(II)溶于NaOH溶液中，缓慢搅拌下滴入脱辅基蛋白溶液中，并在冰浴中静置，然后用NaOH溶液将pH调至9.5，再用G25脱盐柱洗脱，得到重组肌红蛋白。
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