[发明专利]一种无缝多片段克隆的构建方法有效
| 申请号： | 201711221166.6 | 申请日： | 2017-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN108103089B | 公开（公告）日： | 2022-08-05 |
| 发明（设计）人： | 唐国霞;施金秀;罗燕;王焕荣 | 申请（专利权）人： | 赛业（广州）生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/63 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 许飞 |
| 地址： | 510663 广东省广州市广州高新技术产业开发区广州科学*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种无缝多片段克隆的构建方法，载体依次包括启动子序列、核糖体结合位点、Golden Gate反应位点、自杀基因、Golden Gate反应位点、终止子、筛选基因、大肠杆菌复制子和编码抑制子。该方案具有如下优点：载体质粒无需预先经过线性化等处理，且质粒用量少，可降低质粒抽提成本；可以在同一体系中进行限制性内切酶消化反应和连接反应；每次反应均只需要一种限制性内切酶，无需考虑反应条件冲突等问题；反应中，酶切位点会被切除，无需考虑有多余片段引入是否会对目的基因产生不良影响；通过人为控制粘性末端，可避免克隆载体自连产生背景；可进行高达9个片段的无缝连接。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 无缝 片段 克隆 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种用于多片段插入的载体，依次包括启动子序列、核糖体结合位点、Golden Gate反应位点、负筛选基因、Golden Gate反应位点、终止子、筛选基因、大肠杆菌复制子和编码抑制子。
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