[发明专利]一种紫心马铃薯的组织培养方法

摘要

本发明属于植物组织培养技术领域，具体公开了一种紫心马铃薯的组织培养方法。本发明的组织培养方法包括以下步骤：(1)催芽处理；(2)选取外植体并预处理：剪取块根嫩枝部分的茎段作为外植体；(3)灭菌：用氯化汞溶液浸泡；(4)初代培养：将灭菌后的外植体接种于初代培养基上培养；(5)继代培养：将无菌芽切成茎段后，接种于继代增殖培养基中培养；(6)生根培养：将无菌苗接种于生根培养基中培养，得脱毒试管苗。本发明的组织培养方法利用紫心马铃薯幼嫩芽的茎段作为外植体进行组织培养，利用茎段培养诱导无菌芽，无菌芽成活率和成苗率高，可以生产脱毒试管苗，试管苗健壮且脱毒率高，有效提升了紫心马铃薯的品质。

主权项

1.一种紫心马铃薯的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)催芽处理：选取健康紫心马铃薯块根，埋在沙床中催芽，隔天浇水、保持沙床湿润；(2)选取外植体并预处理：待紫心马铃薯块根的芽眼萌发嫩芽长出的苗高至10‑15cm时，剪取嫩芽顶端向下5‑10cm的嫩枝部分，并剪去叶片、留下0.5cm的叶柄；然后，将所述嫩枝剪成带一个腋芽、且长为1.5cm的茎段；采用质量浓度为1‑5g/L的多菌灵溶液浸泡所述茎段10‑15min，再用流水冲洗10‑15min；(3)灭菌：用质量浓度为0.1％且滴加有3滴吐温‑80的氯化汞溶液浸泡上述经过预处理后的外植体4‑7min后，无菌水冲洗5次；(4)初代培养：将上述灭菌后的外植体接种于初代培养基上培养，得无菌芽；所述初代培养基组成为：在1/2MS培养基中添加1.8‑2.3mg/L的6‑BA、0.2‑0.5mg/L的ZT和0.2‑0.4mg/L的GA₃；(5)继代培养：将上述无菌芽切成带一个腋芽的茎段后，接种于继代增殖培养基中培养，得无菌苗；所述继代增殖培养基组成为：在MS培养基中添加1.0‑3.0mg/L的6‑BA、0.1‑0.6mg/L的PP₃₃₃和0.4‑0.8mg/L的ZT；(6)生根培养：将上述无菌苗按单株接种于生根培养基中进行培养，即得脱毒试管苗；所述生根培养基组成为：在1/2MS培养基中添加0.1‑0.6mg/L的NAA、1‑1.5mg/L的AC和0.1‑0.3mg/L的IBA。