[发明专利]一种新型双靶向果胶‑多臂聚乙二醇联合抗癌药物的制备

摘要

本发明公开了一种新型双靶向果胶‑多臂聚乙二醇联合抗癌药物的制备方法。所述的双靶向纳米药物是由叶酸修饰的果胶与载药的多臂聚乙二醇耦合行程前体药物，再与另一种疏水抗癌药物以一定比例混合，自组装得到对结肠癌具有双靶向功能的纳米药物。该方法制备的双靶向纳米药物利用天然果胶良好的生物相容性、生物活性、生物可降解性以及对组织的粘附作用，解决了大多数抗癌药物的水溶性差，生物利用度低等问题，双靶向功能赋予纳米药物对结肠癌更强的选择性治愈功能。本文制备的纳米药物有稳定的载药率、包封率和良好的粒径分布，具有很好的临床应用前景。

主权项

一种新型双靶向果胶‑多臂聚乙二醇联合抗癌药物的制备方法，其特征在于：所述的双靶向纳米药物是由氨基化的叶酸修饰果胶，与载双氢青蒿素的多臂聚乙二醇耦合形成前体药物，再与另一种疏水药物羟基喜树碱以一定比例混合，自组装得到对结肠癌具有双靶向功能的叶酸‑(果胶‑多臂聚乙二醇)‑双氢青蒿素/羟基喜树碱纳米药物。具体步骤如下：(1)取适量叶酸溶于二甲基亚砜中，加入激活剂1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)，反应30分钟，再加入适量乙二胺，吡啶，常温避光反应24小时得到氨基化的叶酸，转移到透析膜内，透析过夜，收集透析膜内耦合物溶液，冷冻干燥，得到黄色粉末；(2)取适量氨基化的叶酸和果胶溶于去离子水，加入激活剂EDC反应30分钟，再加入催化剂4‑二甲氨基吡啶(DMAP)反应24h，将反应后的溶液透析过夜，收集透析膜内耦合物溶液，冷冻干燥，得到叶酸‑果胶黄色粉末；(3)将多臂聚乙二醇溶于吡啶中，加入激活剂EDC反应30分钟，然后加入抗癌药物双氢青蒿素(DHA)和催化剂DMAP，通氮气，35℃下搅拌反应48小时，向反应后的药液混合物中加入三倍体积乙醚(相对于溶液体积)沉淀出多臂聚乙二醇‑双氢青蒿素耦合物，4000转离心收集沉淀，并用乙醚多次洗涤离心，将最终得到的沉淀物用少量去离子水溶解，转移到透析膜内，透析过夜，收集透析膜内耦合物溶液，冷冻干燥，得到多臂聚乙二醇‑双氢青蒿素耦合物白色粉末；(4)取适量多臂聚乙二醇‑双氢青蒿素耦合物，溶解在二甲基亚砜中，加入激活剂EDC反应30分钟，然后加入叶酸修饰的果胶和催化剂DMAP，通氮气，35℃避光反应48小时，向反应后的药液混合物中加入三倍体积乙醚(相对于溶液体积)沉淀出叶酸‑果胶‑多臂聚乙二醇‑双氢青蒿素耦合物前药，4000转离心收集沉淀，并用乙醚多次洗涤离心，将最终得到的沉淀物用少量去离子水溶解，转移到透析膜内，透析过夜，收集透析膜内耦合物溶液，冷冻干燥，得到叶酸‑果胶‑多臂聚乙二醇‑双氢青蒿素黄色粉末；(5)取适量叶酸‑果胶‑多臂聚乙二醇‑双氢青蒿素耦合物溶解在二甲基亚砜中，搅拌均匀，逐滴滴入磷酸缓冲溶液中(PBS，pH＝7.4)，将得到的纳米粒子溶液透析，每隔6小时更换透析外液，收集透析膜内液体，冷冻干燥，得到叶酸‑果胶‑多臂聚乙二醇‑双氢青蒿素纳米粒子粉末；(6)取适量叶酸‑果胶‑多臂聚乙二醇‑双氢青蒿素耦合物和疏水药物羟基喜树碱溶于二甲基亚砜，搅拌均匀，逐滴滴入磷酸缓冲溶液中(PBS，pH＝7.4)，将得到的纳米粒子溶液透析过夜，每隔6小时更换透析外液，收集透析膜内液体，冷冻干燥，得到叶酸‑果胶‑多臂聚乙二醇‑双氢青蒿素/羟基喜树碱纳米粒子粉末。