[发明专利]一种基于液相色谱-质谱联用的高覆盖脂质组学分析方法

摘要

本发明公开了一种基于液相色谱‑质谱联用的高覆盖脂质组学分析方法。基于多种类型基质提取制作单独或混合样本，利用超高效液相色谱‑高分辨质谱数据依赖采集模式自动采集合并各样本脂质代谢物的二级质谱，采用定性分析软件提取脂质保留时间、母离子及其子离子信息；根据脂质质谱结构特征筛选母离子对应的特征子离子，得到特征离子对；将不同类型样本得到的特征离子对信息加和，进一步根据脂质数据库、脂质结构特征以及色谱保留规律对脂质离子对进行扩充，得到最终的脂质离子对库。利用UPLC‑QQQ‑MS通过动态多反应监测模式对脂质离子对进行扫描。与传统非靶向脂质组学分析方法相比，本发明具有更好的重复性、脂质覆盖度。

主权项

1.一种基于液相色谱－质谱联用的高覆盖脂质组学分析方法，其特征在于：①利用超高效液相色谱/组合型四级杆‑轨道阱质谱的数据依赖采集模式自动采集由多种类型样品提取制作的单独或混合样本中所含脂质代谢物的二级质谱；②采用定性分析软件从二级质谱数据中提取所测得脂质的保留时间、母离子及其子离子信息；根据脂质质谱结构特征筛选母离子对应的特征子离子，构成特征离子对；将不同类型样本中得到的特征离子对信息加和；根据脂质数据库及脂质结构特征，对脂质离子对扩充，利用色谱保留规律对扩充的脂质离子对进行保留时间预测，并将其与实测样本中的离子对合并，得到总的脂质特征离子对库；③根据脂质特征离子对库的保留时间和特征离子对信息，对实际待测的所有生物样本的进行高覆盖脂质组学分析分析；首先利用构建的超高效液相色谱/三重四级杆质谱动态多反应监测模式方法在正、负离子模式下对单个样本或2个以上样本混合的质量控制样本(样本量大于1时)进行单针或多针采集，获得该样本中的有效脂质特征离子对，即与脂质离子对库比对中重合的离子对；④利用超高效液相色谱/三重四级杆质谱动态多反应监测在正、负离子模式下对单个待测生物样本仅对有效脂质特征离子进行扫描，获得相应的谱图，再通过定量分析软件进行峰面积积分，得到待测样品中脂质代谢物及其定量信息。