[发明专利]一种基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针

摘要

本发明属于荧光纳米材料和可视化探针的制备技术领域，具体涉及一种基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针的制备方法，该方法主要包括以下步骤：1)采用水热法制备牛血清白蛋白稳定的红荧光发射铜纳米簇；2)通过羧胺偶联法制备铜纳米簇/荧光素纳米复合物；3)加入吗啉胍分子与牛血清白蛋白结合引起铜纳米簇红荧光淬灭，而未对荧光素绿荧光造成显著影响；4)构建铜纳米簇与荧光素的荧光发射峰强度比率与吗啉胍摩尔浓度之间的线性关系，以及吗啉胍摩尔浓度与其荧光颜色的对应关系，制备出检测吗啉胍的比率荧光可视化探针；该探针的工艺简单，制备成本低，产品灵敏度高，适用于生物样品中吗啉胍的比率荧光可视化检测。

主权项

1.一种基于铜纳米簇/荧光素复合物的吗啉胍比率荧光探针的制备方法，其特征在于，该方法具体包括以下步骤：(1)制备CuNCs：配制摩尔浓度为0.1摩尔/升的氯化铜水溶液50毫升，加入0.25克牛血清白蛋白，在磁力搅拌下配制备成均质溶液，然后逐滴加入1毫升50wt％水合肼，在室温下反应6小时，然后用丙酮萃取，吸取悬浊液离心，用乙醇洗涤，真空干燥，制得CuNCs；(2)制备CuNCs/荧光素复合物：配制质量浓度为1毫克/毫升的CuNCs水溶液50毫升，加入5毫克氮‑羟基琥珀酰亚胺和10毫克1‑乙基‑3‑(3‑二甲基氨)丙基‑碳二亚胺盐酸钠，在室温和磁力搅拌下，逐滴加入摩尔浓度为0.1摩尔/升的荧光素水溶液10毫升，反应1小时后产物用孔径为0.2微米的微滤膜过滤，滤液用截流分子量为1000道尔顿的透析袋透析，清除未反应的原料，袋中溶液用旋转蒸发去除90％溶剂，离心分离，乙醇洗涤，干燥得到CuNCs/荧光素复合物；(3)配制1毫克/毫升的CuNCs/荧光素复合物水溶液10毫升，逐滴加入摩尔浓度为10毫摩尔/毫升的吗啉胍溶液，在室温和磁力搅拌下形成一系列均质混合溶液，采用荧光光谱仪测定不同吗啉胍共存浓度下均质溶液的荧光发射光谱，拟合CuNCs与荧光素荧光发射峰强度的比率I_荧光素/I_CuNCs与待测物质中吗啉胍的浓度之间的线性关系，进而构建出可定量检测吗啉胍摩尔浓度的比率荧光探针；(4)将一系列均质溶液转入玻璃小瓶，放置于暗箱式紫外灯箱中，在365纳米紫外灯照射下，用数码相机拍摄记录小瓶中溶液的荧光颜色，依据小瓶中吗啉胍的浓度与其荧光颜色的对应关系，实现对吗啉胍摩尔浓度的比率荧光颜色可视化检测。