[发明专利]一种MTRR的SNP位点的快速扩增检测试剂盒及检测方法在审
申请号: | 201711267655.5 | 申请日: | 2017-12-05 |
公开(公告)号: | CN109468371A | 公开(公告)日: | 2019-03-15 |
发明(设计)人: | 不公告发明人 | 申请(专利权)人: | 湘潭智联技术转移促进有限责任公司 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6869;C12N15/11 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 冯子玲 |
地址: | 410100 湖南省湘潭*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明公开了一种MTRR的SNP位点的快速扩增检测试剂盒和检测方法,其中所述试剂盒由高效扩增组和焦磷酸测序组组成,其中高效扩增组用于MTRR A66G的SNP位点的线性指数PCR扩增,扩增产物经焦磷酸测序组测序,扩增引物序列如序列表SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示,退火引物序列如序列表SEQ ID NO:4所示。本发明采用线性指数扩增的目标片段扩增方法,精准设计的扩增引物扩增效率高且错配少,不仅大大增加了扩增效率,且直接扩增出单链DNA可直接用于焦磷酸测序,无需对扩增产物进行标记和双链分离,避免了繁冗的实验步骤,也减少了强碱性试剂对扩增片段的损伤。 | ||
搜索关键词: | 扩增 焦磷酸测序 试剂盒 扩增产物 扩增检测 扩增效率 线性指数 退火 扩增引物序列 强碱性试剂 扩增片段 扩增引物 目标片段 实验步骤 引物序列 单链DNA 检测 测序 错配 双链 损伤 | ||
【主权项】:
1.一种MTRR的SNP位点的快速扩增检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒由高效扩增组和焦磷酸测序组组成,其中高效扩增组包括:扩增引物、DNA聚合酶、扩增缓冲液、dNTPs和Mg2+,高效扩增组用于MTRR A66G的SNP位点的线性指数PCR扩增;扩增产物退火后经焦磷酸测序组测序,焦磷酸检测组包括:退火引物、DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶、三磷酸腺苷双磷酸酶、dNTP,以及Klenow酶。
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