[发明专利]一种提高尿促性素效价的方法在审
申请号: | 201711293332.3 | 申请日: | 2017-12-08 |
公开(公告)号: | CN109897095A | 公开(公告)日: | 2019-06-18 |
发明(设计)人: | 刘乃山;夏衬来;于晓娜 | 申请(专利权)人: | 青岛康原药业有限公司 |
主分类号: | C07K14/59 | 分类号: | C07K14/59;C07K1/20;C07K1/18 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266300 山东省青岛*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用层析技术纯化尿促性素的方法。具体的说,就是运用亲和层析和离子交换层析纯化低效价尿促性素,将效价约为30iu/mg的尿促性素效价提高到约600iu/mg,并且各项指标均符合中国药典规定。本发明方法操作简单,生产成本低,产品纯度高,更能满足临床和科研的需求。 | ||
搜索关键词: | 尿促性素 效价 层析技术纯化 离子交换层析 生产成本低 产品纯度 亲和层析 科研 | ||
【主权项】:
1.一种提高尿促性素效价的方法,其特征在于,方法包括:将低效价尿促性素通过亲和层析、离子交换层析进行纯化,最终得到高纯度的尿促性素,其特征在于,该方法包括如下步骤:尿促性素粗品用含NaCl、EDTA的Tris‑HCl缓冲液溶解,离心去沉淀,得上清液;亲和层析:用含NaCl的Tris‑HCl平衡液平衡Argmatin‑ Sepharose柱,上清液上柱后,用含NaCl、盐酸胍的Tris‑HCl缓冲液洗脱,洗脱液经超滤脱盐至无氯离子;(3)离子交换层析:将上述超滤脱盐后的溶液加NaCl和1mol/L Tris‑HCl稀释至一定浓度,上样于DEAE‑Sepharose Fast Flow柱,用含NaCl的Tris‑HCl平衡液冲洗,换用含不同浓度NaCl的Tris‑HCl洗脱液洗脱;紫外检测,收集酶活性部分,超滤浓缩后冷冻干燥,即得成品。
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