[发明专利]一种用于口蹄疫病毒的可视化快速检测的检测试剂盒及其检测方法有效
| 申请号： | 201711334284.8 | 申请日： | 2017-12-07 |
| 公开（公告）号： | CN108070677B | 公开（公告）日： | 2019-12-03 |
| 发明（设计）人： | 王建昌;刘立兵;王金凤;石蕊寒 | 申请（专利权）人： | 河北出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11 |
| 代理公司： | 13120 石家庄国为知识产权事务所 | 代理人： | 高欣<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址： | 050051 河*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明涉及用于口蹄疫病毒的可视化快速检测的检测试剂盒及其检测方法。所述试剂盒包括以口蹄疫病毒3D基因为模板设计RPA引物、nfo探针，其中所述RPA引物包括FMDV‑nfo‑F和FMDV‑nfo‑R，所述nfo探针为FMDV‑nfo‑P；所述检测方法以口蹄疫病毒3D基因为靶基因，以O型口蹄疫病毒RNA为模板进行RT‑RPA扩增，在反应体系中加入M‑MLV反转录酶和RNA酶抑制剂，用侧流层析试纸条进行检测。本发明建立的RT‑RPA法可以在较大的温度范围内操作，扩增时间短，显色反应肉眼可见，能脱离对大型仪器、专业操作人员及正规实验室的依赖。 | ||
| 搜索关键词： | 口蹄疫病毒 检测 检测试剂 快速检测 可视化 扩增 探针 引物 层析试纸条 大型仪器 反转录酶 模板设计 肉眼可见 显色反应 靶基因 试剂盒 侧流 脱离 | ||
【主权项】：
1.一种用于口蹄疫病毒的可视化检测的检测试剂盒，其特征在于，包括以口蹄疫病毒3D基因为模板设计RPA引物、nfo探针，扩增片段大小为258bp，其中/n所述RPA引物包括FMDV-nfo-F和FMDV-nfo-R，所述FMDV-nfo-F的序列为5′-TTGGTCACTCCATTACCGATGTCACTTTCCTC-3′，所述FMDV-nfo-R的序列为5′-Biotin-AACGCAGGTAAAGTGATCTGTAGCTTGGA AT-3′；所述nfo探针为FMDV-nfo-P，所述FMDV-nfo-P的序列为5′-FAM-GC ACGCCGTGGGACCATACAGGAGAAGTTGAT(THF)TCCGTGGCAGGACTCG-C3-spacer-3′。/n
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