[发明专利]一种SPE法提取循环肿瘤DNA的方法有效
| 申请号： | 201711364691.3 | 申请日： | 2017-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN109929830B | 公开（公告）日： | 2023-01-20 |
| 发明（设计）人： | 梁鑫淼;李秀玲 | 申请（专利权）人： | 中国科学院大连化学物理研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司 21001 | 代理人： | 郑虹 |
| 地址： | 116023 *** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 本发明提供一种SPE法提取循环肿瘤DNA的方法，属生物技术领域。本发明具体步骤如下：1)将循环肿瘤DNA富集材料装入移液枪枪头或者凝胶上样吸头中，形成微固相萃取柱，采用洗脱液和上样液活化及平衡微固相萃取柱，将生物样品溶解于上样液中，并上到微固相萃取柱上，循环肿瘤DNA富集材料与生物样品的质量比为100～1000:1；2)采用5‑200倍柱体积的淋洗液冲洗萃取柱，淋洗液pH 0‑7；3)采用5‑100倍柱体积的洗脱液洗脱得循环肿瘤DNA，洗脱液pH 10‑12；所述DNA富集材料为金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒材料。所述DNA富集材料为金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒。本发明的方法在提取循环肿瘤DNA方面表现出了高选择性和高通量等特点，可以实现循环肿瘤DNA的有效分离和富集。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 spe 提取 循环 肿瘤 dna 方法 | ||
【主权项】：
1.一种SPE法提取循环肿瘤DNA的方法，其特征在于采用分散固相萃取模式，具体步骤如下：1)将循环肿瘤DNA富集材料装入移液枪枪头或者凝胶上样吸头中，形成微固相萃取柱，采用洗脱液和上样液活化及平衡微固相萃取柱，将生物样品溶解于上样液中，并上到微固相萃取柱上，循环肿瘤DNA富集材料与生物样品的质量比为100～1000:1；2)采用5‑200倍柱体积的淋洗液冲洗萃取柱，淋洗液pH 0‑7；3)采用5‑100倍柱体积的洗脱液洗脱得循环肿瘤DNA，洗脱液pH 10‑12；上述整个过程在10‑60℃进行；所述循环肿瘤DNA富集材料为金属内核/碳壳层结构的纳米颗粒材料。
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