[发明专利]一种高效快速的菊花转基因方法有效

专利信息
申请号: 201711382247.4 申请日: 2017-12-20
公开(公告)号: CN108118068B 公开(公告)日: 2021-03-26
发明(设计)人: 滕年军;徐素娟;赵静雅;蒋甲福;陈素梅;陈发棣;房伟民 申请(专利权)人: 南京农业大学
主分类号: C12N15/82 分类号: C12N15/82
代理公司: 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人: 徐冬涛;李晓峰
地址: 210043 江苏省南京市栖霞区八卦洲街道江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种高效快速的菊花转基因方法,属于菊花遗传育种及分子生物学领域。该方法包括:(1)取菊花茎段作为外植体置于预培养基上进行预培养;(2)将转化有重组表达载体的农杆菌菌液进行活化和培养,然后富集菌体,并用MS液体培养基重悬作为侵染液;(3)将步骤(1)中预培养后的外植体浸入侵染液中采用真空负压法对其进行侵染;(4)将侵染后的外植体置于预培养基上在黑暗条件下进行共培养;之后在脱羧培养基上进行脱羧培养,最后依次使用选择培养基1和选择培养基2进行选择培养,确定无农杆菌爆发后,继代至生根培养基进行进一步的生根筛选得到菊花转基因植株。与传统叶盘法菊花转基因相比,本发明显著缩短了转基因的时间,提高了菊花转基因的转化效率,减少了科研工作者的工作量,为菊花的高效转化和基因功能分析提供新途径,也为其他植物的转基因提供了新思路。
搜索关键词: 一种 高效 快速 菊花 转基因 方法
【主权项】:
一种高效快速的菊花转基因方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)取菊花茎段作为外植体置于预培养基上进行预培养;(2)将转化有重组表达载体的农杆菌菌液进行活化和培养,然后富集菌体,并用MS液体培养基重悬作为侵染液;(3)将步骤(1)中预培养后的外植体浸入侵染液中采用真空负压法对其进行侵染;(4)将侵染后的外植体置于预培养基上在黑暗条件下进行共培养;之后在脱羧培养基上进行脱羧培养,最后依次使用选择培养基1和选择培养基2进行选择培养,确定无农杆菌爆发后,继代至生根培养基进行进一步的生根筛选得到菊花转基因植株。
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