[发明专利]以水分子为催化反应基底的电信号标记物及传感方法有效
| 申请号： | 201711439567.9 | 申请日： | 2017-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN108169305B | 公开（公告）日： | 2019-12-31 |
| 发明（设计）人： | 夏宁;刘林;王薪;邓德华 | 申请（专利权）人： | 安阳师范学院 |
| 主分类号： | G01N27/327 | 分类号： | G01N27/327 |
| 代理公司： | 41126 郑州立格知识产权代理有限公司 | 代理人： | 田磊;贺保平 |
| 地址： | 455000 河南省安*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 以水分子为催化反应基底的电信号标记物，所述的电信号标记物为多肽‑铜离子络合物，所述的多肽的序列特征是XYH三肽，从N‑端开始计算，第三个氨基酸H是组氨酸，X、Y是除组氨酸和脯氨酸之外的任意氨基酸。以水分子为催化反应基底的传感方法，包括以下步骤：A：识别探针/多肽‑铜离子/纳米金复合物的制备，B：工作电极的制备；C：将得到的电极采用循环伏安法进行电化学测试。本发明采用水分子作为电化学传感器催化反应的基底，具有环境友好、操作简单、成本较低、稳定性好等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 催化反应 水分子 基底 标记物 多肽 组氨酸 氨基酸 传感 制备 电化学传感器 纳米金复合物 铜离子络合物 电化学测试 循环伏安法 工作电极 环境友好 序列特征 电极 脯氨酸 铜离子 三肽 探针 | ||
【主权项】：
1.以水分子为催化反应基底的传感方法，所述的传感方法采用电信号标记物为多肽-铜离子络合物，所述的铜离子为二价铜离子，所述的多肽为DCH或CDH或ECH或CEH，其中D代表天冬氨酸，C代表半胱氨酸，H代表组氨酸，E代表谷氨酸，其特征在于：包括以下步骤：/nA：识别探针/多肽-铜离子/纳米金复合物的制备，包括以下子步骤：/nA1：纳米金粒子的合成；/n采用前驱体为氯金酸，还原剂为柠檬酸钠，将氯金酸溶液加热至沸腾，然后快速加入柠檬酸钠溶液，继续加热沸腾30分钟，然后将溶液冷却到室温，即得到柠檬酸稳定的纳米金粒子溶液；/nA2：识别探针/多肽/纳米金复合物的合成；/n用移液枪取出A1得到的纳米金粒子溶液，然后加入包含识别探针的PBS溶液，PBS溶液浓度为2 mM, pH为7.0，静止12小时以上得到识别探针修饰的纳米金，再向反应溶液中加入多肽溶液，震荡混合12小时以上得到识别探针/多肽/纳米金复合物，将该反应产物离心分离，弃除上层未反应的识别探针和多肽，将所得沉淀物用二次水洗涤后，再用PBS溶液分散；/nA3：识别探针/多肽-铜离子/纳米金复合物的合成;/n向A2所得的分散液中加入含硫酸铜的PBS溶液，得到识别探针/多肽-铜离子/纳米金复合物，低温保存备用；/nB：工作电极的制备；/nB1：在金电极表面修饰捕获探针分子，将金电极浸泡在含有捕获探针的溶液中；/nB2：采用6-巯基己醇封闭B1得到的电极上的未反应的金表面，将B1得到的电极在1 mM的6-巯基己醇溶液中浸泡， 再用乙醇和蒸馏水冲洗电极表面，晾干；/nB3：检测目标物和识别探针/多肽-铜离子/纳米金复合物的捕获，将B2得到的电极在含检测目标物和识别探针/多肽-铜离子/纳米金复合物的PBS溶液中浸泡，再用蒸馏水冲洗干净电极表面，晾干；/nC：将B3得到的电极采用循环伏安法进行电化学测试。/n
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